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2021 Fiscal Year Annual Research Report

Establishment of a Basis for Assessing the Effects of Chemical Substances on Environmental Indicator Organisms Toward Society 5.0

Research Project

Project/Area Number 21H03602
Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

渡辺 肇  大阪大学, 大学院工学研究科, 教授 (80212322)

Project Period (FY) 2021-04-01 – 2026-03-31
Keywordsミジンコ / 機械学習 / 遺伝子編集 / 化学物質影響
Outline of Annual Research Achievements

研究では旧態依然とした化学物質影響評価法を脱却し時代に即した評価法を確立するために、近年急速に進展している2つの技術、機械学習による画像処理と遺伝子編集技術を環
境指標生物であるミジンコに利用した化学物質影響評価法の基盤を構築する。化学物質曝露
によるマクロな形質変化を画像から取得し、化学物質影響の解明や評価につながる遺伝子レ
ベルのアプローチに遺伝子編集技術を利用する。本研究課題の遂行により、環境指標生物へ
の化学物質影響の解析が促進されるのみならず、ハイスループット化や省力化が期待でる。機械学習を導入した画像解析による化学物質影響評価法は他の試験生物への拡張も可能であり、今後の化学物質影響評価の方向性を決める上でも重要な指標となる。
今年度は種々の条件下で画像を取得し、画像処理方法や画像認識の性能を評価を行った結果、ディープニューラルネットワークを用いた生物のトラッキングが可能なDeepLabCutを使用することで簡便かつ良好な結果を得られる可能性を見出した。ミジンコの画像上にトラッキングポイントを設定し、囲まれた部分の面積を算出することによりサイズの定量化を試みた。産まれて24時間以内 、1週間、2週間、3週間のミジンコの撮影を行い、大きさの差を検出できるか検証した。また並行して、異なる条件下で飼育したミジンコの画像を取得し、その評価を進めている。一方で、これらの評価方法を検証するために、遺伝子編集技術により遺伝子を改変したミジンコを作製し、評価するための準備を進めている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

種々の条件下で画像を取得し、画像処理方法や画像認識の性能を評価を行った結果、DeepLabCutを使用することで簡便かつ良好な結果を得られる可能性を見出した。
現在、異なる条件下で飼育したミジンコの画像を取得し、その評価を進めている。

Strategy for Future Research Activity

DeepLabCutを利用することで、遊泳しているミジンコをトレースしながら、その大きさを評価できる可能性が明らかになった。現時点では、取得画像の座標値として大きさの情報を得ていることから、今後は絶対的な単位(具体的にはmm単位)に換算する手法を開発する必要がある。
合わせて遺伝子編集技術により遺伝子を改変したミジンコを作成しその評価を進めていく。

  • Research Products

    (13 results)

All 2023 2022

All Journal Article (3 results) Presentation (9 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 3 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Neonatal administration of synthetic estrogen, diethylstilbestrol to mice up-regulates inflammatory Cxclchemokines located in the 5qE1 region in the vaginal epithelium2023

    • Author(s)
      Kitamura Ayaka、Jiayue Chen、Suwa Tomoya、Kato Yasuhiko、Wada Tadashi、Watanabe Hajime
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 18 Pages: e0280421

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0280421

  • [Journal Article] Regulation of Doublesex1 Expression for Environmental Sex Determination in the Cladoceran Crustacean Daphnia2022

    • Author(s)
      Kato Yasuhiko、Watanabe Hajime
    • Journal Title

      Frontiers in Cell and Developmental Biology

      Volume: 10 Pages: -

    • DOI

      10.3389/fcell.2022.881255

  • [Journal Article] CELF1 represses Doublesex1 expression via its 5’ UTR in the crustacean Daphnia magna2022

    • Author(s)
      Tirta Yusrifar Kharisma、Adachi Shungo、Perez Christelle Alexa Garcia、Adhitama Nikko、Nong Quang Dang、Natsume Toru、Kato Yasuhiko、Watanabe Hajime
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 17 Pages: e0275526

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0275526

  • [Presentation] ゲノム編集ミジンコの作出と環境依存型性決定機構の解析への応用2022

    • Author(s)
      加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      日本ゲノム編集学会第7回大会
    • Invited
  • [Presentation] ノックイン技術で迫るミジンコにおける環境依存的な性決定の仕組み2022

    • Author(s)
      加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      日本動物学会 第93回早稲田大会
    • Invited
  • [Presentation] ミジンコの環境依存型性決定における doublesex1 遺伝子の発現制御2022

    • Author(s)
      加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      第8回生殖若手の会
    • Invited
  • [Presentation] オオミジンコにおける有用タンパク質高発現ベクターの構築と利用2022

    • Author(s)
      柴田成樹、リー デイビッド、アディタマ ニッコ、加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      第74回日本生物工学会大会
  • [Presentation] オオミジンコにおけるCRISPR/dCas9を利用した遺伝子発現活性化システムの開発2022

    • Author(s)
      原あや乃、アディタマ ニッコ、加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      第74回日本生物工学会大会
  • [Presentation] Fluorescence live imaging of the apoptotic effects induced by a juvenile hormone analog, fenoxycarb, in the developing ovary of Daphnia magna2022

    • Author(s)
      Lichi Hsieh、Nikko Adhitama、Yasuhiko Kato、Hajime Watanabe
    • Organizer
      第 45 回日本分子生物学会大会
  • [Presentation] 甲殻類オオミジンコにおけるサーチュイン1遺伝子の機能解析2022

    • Author(s)
      平野啓太、アディタマ ニッコ、加藤泰彦、渡邉肇
    • Organizer
      第 45 回日本分子生物学会大会
  • [Presentation] Analysis of the transactivation region of the 5´ UTR overlapping lncRNA DAPALR in the crustacean Daphnia magna2022

    • Author(s)
      Yasuhiko Kato、Christelle Alexa G Perez、Hajime Watanabe
    • Organizer
      Cold Spring Harbor Asia (CSHA) RNA Biology
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] The RNA binding protein CELF1 represses the male determining gene Doublesex1 via its 5_ UTR in the crustacean Daphnia magna2022

    • Author(s)
      Yusrifar K Tirta、Shungo Adachi、Christelle Alexa G Perez、Nikko Adhitama、Quang Dang Nong、Toru Natsume、Yasuhiko Kato、Hajime Watanabe
    • Organizer
      Cold Spring Harbor Asia (CSHA) RNA Biology
    • Int'l Joint Research
  • [Book] The Mechanism for Establishing the Binary Sex with Environmental Signals in the Crustacean Daphnia magna2022

    • Author(s)
      Kato Yasuhiko、Watanabe Hajime
    • Total Pages
      233
    • Publisher
      Springer
    • ISBN
      9789811953583

URL: 

Published: 2023-12-25  

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