2022 Fiscal Year Annual Research Report
犬糸状虫を媒介しない蚊の創出に向けた病原体媒介機構の分子遺伝学的解明
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22H02510
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine |
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Principal Investigator |
福本 晋也 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 准教授 (50376422)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
茅野 光範 帯広畜産大学, 畜産学部, 准教授 (20590095)
相内 大吾 帯広畜産大学, グローバルアグロメディシン研究センター, 准教授 (50552783)
白水 貴大 藤田医科大学, 病態モデル先端医学研究センター, 助教 (80804608)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 犬糸状虫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目的とする。
現在までに得られた一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析の結果、3カ所の表現型特異的ゲノム領域が推定された。そ こで、本申請ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を遺伝子レベルで 同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目指した。
媒介株と非媒介株について特にEXON領域に着目して遺伝子の差異について解析した。表現型特異的な遺伝型が検出された箇所について分子生物学的な解析を行ったところ、これらの差異は表現型の発現に直接関与するかは不明であるが、蚊のフィラリア媒介能を判定かのうな指標になることが示唆された。
一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析ではバックグランドの変異が存在するため、解析解像度を向上が望ましいことが示唆された。そこで抵抗性系統・感受性系統をそれぞれ近交化し解析精度を高めることを目指した。蚊は近交度を高めるとコロニーが途絶えることが多いことが大きな問題となる。2022年度1年間を用い両表現型ともに七世代以上の近交化され繁殖可能なコロニー樹立に成功した、今後ゲノム解析に共する予定である。
表現型責任遺伝子解析のためex vivoでのノックダウン実験系の確立を行った。ex vivoでRNAi実験系とフィラリアの分化を解析する実験系の確立に成功した。機能減衰型の実験で表現型について重要な機能を持つ遺伝子の推定を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
最大の困難が予想されていた媒介性系統のヤブカの近交化に成功、ex vivo実験系の確立にも成功したため機能減衰型の実験系も整備できたため概ね順調に研究は進展している。しかしながら機能増強型実験系については真に有効な実験系ができておらず、現状、スクリーニング実験系がなく組換え蚊を作成する以外の表現型確認法がないため。
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| Strategy for Future Research Activity |
推定表現型責任領域の解析精度を上げるため、今年度において作成した近交系統のゲノム解析等をすすめる。また機能増強型の表現型解析法の樹立について、ウイルス等の使用を検討する。以上の解析により蚊のフィラリア抵抗性表現型の核心にせまっていきたい。
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