2022 Fiscal Year Annual Research Report

胆汁酸ヒト化マウスを用いたNAFL/NASH/HCC進展メカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number	22H02853
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Tokyo Medical University
Principal Investigator	本多彰東京医科大学, 医学部, 教授 (10468639)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	宮崎照雄東京医科大学, 医学部, 准教授 (60532687) 池上正東京医科大学, 医学部, 教授 (40439740) 岩本淳一東京医科大学, 医学部, 教授 (10384950)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Keywords	マウスモデル / 胆汁酸 / 非アルコール性脂肪肝 / 非アルコール性脂肪肝炎 / 肝細胞癌
Outline of Annual Research Achievements	マウスは医学研究に最も広く用いられている動物である。しかし、胆汁酸組成がヒトと大きく異なるため、胆汁酸の関与が推測される代謝疾患や発癌に関して、従来の研究結果をヒトに外挿するには注意が必要である。この問題を解決するために、本研究では我々が開発した胆汁酸ヒト化マウスを用いて、これまでより格段にヒトに近い非アルコール性脂肪肝（NAFL）/非アルコール性脂肪肝炎（NASH）/肝細胞癌（HCC）のモデルを作製し、胆汁酸が病態の進展に与える影響を解明することを目的としている。本研究目的に従って、令和4年度は下記のように新しいNAFL/ NASH/ HCCモデルの作製を開始し、サンプルの得られたものから順次解析を行なった。（1） 10週齢のWTマウス（C57BL/6J）と胆汁酸ヒト化マウス（C57BL/6J baseのCyp2a12/Cyp2c70 double KO）を標準食（オリエンタル酵母社製CRF-1）または高脂肪高ショ糖食（同社製F2HFHSD）で飼育した。（2）15週後、30週後、47週後に一定数ずつ安楽死させ、体重、精巣上体脂肪の秤量と、血液、胆嚢胆汁、肝組織、小腸、盲腸内容物、糞便の採取と保存を行った。また残りのマウスは60週後に採材の予定であり継続飼育中である。（3）高脂肪高ショ糖食投与のWTマウスとDKOマウスで体重増加の程度に差はなかったが、30週後に行なったグルコースおよびインスリン負荷試験によるインスリン抵抗性の測定では、DKOマウスの方がインスリン抵抗性が軽い結果であった。しかし、高脂肪高ショ糖食投与のDKOマウスの方がWTより病理学的に線維化の進行が見られ、高脂肪高ショ糖食投与47週後のDKOマウスには半数以上で肉眼的にHCCの発生が認められた。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 高脂肪高ショ糖食投与によるNAFL/NASH/HCCモデルの作製が予定通りに進行中であり、当初の予想通り、DKOマウスで線維化が進行してNASHとなり、高率にHCCの発生が認められている。
Strategy for Future Research Activity	次年度は高脂肪高ショ糖食投与60週マウスの採材を完了させる。引き続いて、採材したサンプルを用いて、胆汁酸分析、遺伝子発現解析、病理標本の免疫染色などを行なって、高脂肪高ショ糖食投与時WTに比べてDKOで線維化が進行して発癌しやすい理由の解明を進める計画である。