2023 Fiscal Year Annual Research Report
Development of band-edge-defective near-infrared fluorescent quantum dots for deep biological temperature imaging measurement
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22H03938
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
湯川 博 名古屋大学, 未来社会創造機構, 特任教授 (30634646)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
須賀 英隆 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (20569818)
亀山 達矢 名古屋大学, 工学研究科, 准教授 (40646759)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 量子ドット / 温度計測 / iPS細胞 / 脳オルガノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞内に導入されたQTISに対して、高速多光子共焦点レーザー顕微鏡（A1RPM Nikon社製、設置済み）の蛍光分光機能を応用することで、バンド端発光と欠陥発光の蛍光強度比較（スペクトル面積比較）から細胞内温度を計測した。細胞種としては、がん細胞（HepG2、A549細胞など）、幹細胞（iPS細胞、脂肪由来幹細胞（ASCs）など）を用い、細胞周期や炎症反応など細胞状態変化に伴う温度変化を計測した。また、他の細胞用温度プローブ（有機蛍光温度プローブ、蛍光ナノダイヤモンドなど）の計測結果とも比較することで、その精度や有用性を比較検証した。更に、オルガノイド内部の細胞温度計測に対しても取り組み、iPS細胞から視床下部-下垂体ホルモン産生脳オルガノイドを分化誘導し、それらのオルガノイド内部（視床下部）と表層部（ホルモン産生細胞）に位置する各細胞群へのQTIS導入を検討した。そして、オルガノイド内部及び表層部の細胞温度の違いを明らかにした。また、90日間の分化成熟過程の温度の違いに加え、ホルモン産生時の温度変化についても検証することで、オルガノイド機能発現と細胞温度の関係を検証した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
細胞内への量子ドット導入が確実に進捗し、温度計測についても実現できている。また、計測対象も細胞だけに留まらず、オルガノイドにも展開できてきている。更に、これから更に加速するが、生体内での計測にも着手しつつあり、当初の計画に対して概ね順調に進展していると判断できるため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の研究方針としては、生体への計測を実施する。具体的には開発したQTISを直腸内に投与して温度計測を実施し、直腸温度計の結果と比較することで、生体内深部での計測信頼性を担保する。その後、QTISを主要な組織・臓器（脳、肺、肝臓、腎臓、脾臓など）に投与し、未だ実現されていない主要組織・臓器の温度計測に取り組む。なお、開腹すると体温変化が生じるため、最先端のIn vivo蛍光イメージングシステムであるIVIS Spectrum CT （PerkinElmer社製、設置済み）を用いて、開腹せずに生体深部からのNIR領域の蛍光強度を高感度に計測することで実現する。次に、炎症マウス生体内臓器の温度計測に取り組む。生体は炎症により体温が上昇することが知られているが、各組織・臓器の炎症による正確な温度変化はほとんど明らかにされていない。そのため本研究では、既に研究代表者が実施経験のある肺、肝臓、脳における炎症モデルマウスを用いて、各組織・臓器の温度計測を実施する。そして、正常モデルマウスと比較することで、炎症状態と組織・臓器温度の相関関係について検証する。更に、マウス生体内深部の細胞温度計測にチャレンジする。肺、肝臓、脳炎症モデルマウスに対するASCs移植治療の有用性を検証してきた経験を活かし、各炎症モデルマウスに投与され、生体内深部の炎症部位に集積したASCs温度計測を実現する。また、非炎症部位に集積したASCs温度と比較することで、未だ明らかになっていない炎症部位における幹細胞の細胞温度変化と機能発現への影響を検証する。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] In Vivo Real-Time Quantum Dots Imaging to Track Transplanted Adipose Stem Cells in Different Inflammatory States of Acute Liver Failure Mice2023
Author(s)
Yamada S., *Yukawa H., Oshizumi Y., Kitamura K., Mizumaki T., Oohara T., Nanizawa E., Hirano F., Sato K., Ishikawa T., Baba Y.
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Journal Title
Cell Transplant.
Volume: 32
Pages: 1-11.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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