2023 Fiscal Year Annual Research Report
単一T細胞上でのTCRとp/MHCの相互作用を用いたTCR抗原同定法の開発
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23H02732
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
岸 裕幸 富山大学, 学術研究部医学系, 特別研究教授 (60186210)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 栄治 富山大学, 学術研究部医学系, 助教 (70459733)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | T細胞受容体 / 主要組織適合遺伝子複合体 / ペプチド/MHC複合体 / cis相互作用 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
従来T 細胞はT 細胞上の抗原受容体（TCR）で標的細胞上の主要組織適合抗原（MHC）分子に提示された抗原ペプチドを認識し活性化される。それに対し、我々は、1 個のT 細胞上でTCR とその抗原ペプチド/MHC 複合体が相互作用しT 細胞が活性化することを示し、それを「cis 相互作用」と命名した（Kobayashi, Kishi, Nat Biomed Eng, 2022）。本研究ではTCR とその抗原ペプチド/MHC 複合体の「cis相互作用」を用いて、抗原未知の標的細胞反応性TCR の抗原を簡便に同定する方法の開発を目的としている。具体的には、目的TCR と抗原提示MHC 分子を同時に発現させたレポーターT 細胞に、抗原cDNA を含む発現型cDNA ライブラリーを遺伝子導入し、抗原cDNA が導入されたレポーターT 細胞が「cis 相互作用」により活性化されるのを指標に抗原cDNA を簡便に同定する。2023年度は、内在性TCR陰性の既存のT細胞株を比較し、高反応性のT細胞株をレポーターT細胞の候補として選択した。さらに、SV40 Large T抗原をT細胞株に発現させることで、細胞内に導入したcDNAライブラリーが細胞内で増幅する工夫を行った。また、目的TCRの抗原がBW細胞に発現していないかを解析・検証している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2023年度は、内在性TCR陰性の既存のT細胞株を比較し、高反応性のT細胞株としてBW細胞をレポーターT細胞の候補として選択した。さらに、BW T細胞株にSV40 Large T抗原を発現させることで、細胞内に導入したcDNAライブラリーが細胞内で増幅するようにした。BW細胞に目的TCRの抗原が発現していると、MHC分子に抗原が提示され、TCRとのcis相互作用により、活性化されてしまい抗原のスクリーニングができないため、現在、BW細胞に目的TCRと抗原提示MHC分子を発現させ、活性化しないかどうかを検証している。
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| Strategy for Future Research Activity |
目的TCRを決めることができれば、
1) 目的TCRの標的細胞より発現型cDNAライブラリーを作製する。
2) 目的TCRと抗原提示MHC分子をいっしょに発現させたレポーターT細胞にcDNAライブラリーを導入し、目的TCRと抗原提示MHC分子との「cis相互作用」を用いて抗原cDNAを同定するためのプロトコールを確立していく。
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[Journal Article] DPP8 Selective Inhibitor Tominostat as a Novel and Broad-Spectrum Anticancer Agent against Hematological Malignancies2023
Author(s)
Kikuchi S, Wada A, Kamihara Y, Okazaki K, Jawaid P, Rehman MU, Kobayashi E, Susukida T, Minemura T, Nabe Y, Iwao N, Ozawa T, Hatano R, Yamada M, Kishi H, Matsuya Y, Mizuguchi M, Hayakawa Y, Dang NH, Sakamoto Y, Morimoto C, Sato T
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Journal Title
Cells
Volume: 12
Pages: 1100～1100
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Secretory GFP reconstitution labeling of neighboring cells interrogates cell?cell interactions in metastatic niches2023
Author(s)
Minegishi M, Kuchimaru T, Nishikawa K, Isagawa T, Iwano S, Iida K, Hara H, Miura S, Sato M, Watanabe S, Shiomi A, Mabuchi Y, Hamana H, Kishi H, Sato T, Sawaki D, Sato S, Hanazono Y, Suzuki A, Kohro T, Kadonosono T, Shimogori T, Miyawaki A, Takeda N, Shintaku H, Kizaka-Kondoh S, Nishimura S
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Journal Title
Nature Communications
Volume: 14
Pages: 8031
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] HLA-C-restricted CTLs specific for SARS-CoV-2 nucleocapsid display potent antiviral activity across viral variants and are maintained as a long-lived memory cells2023
Author(s)
Yoshihiko Goto, Mako Toyoda, Toong Seng Tan, Hiroshi Hamana, Takeshi Nakama, Hanyu Li, Yoshiki Aritsu, Mizuki Kitamatsu, Hiroyuki Kishi, Yusuke Tomita, Takuro Sakagami, Takamasa Ueno and Chihiro Motozono
Organizer
The 24th Kumamoto AIDS Seminar
Int'l Joint Research
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[Presentation] Cross-reactivity of HLA-A*24:02-restricted T-cell receptors towards SARS-CoV-2 mutations2023
Author(s)
Takeshi Nakama, Aaron Wall, Hiroshi Hamana, Huanyu Li, Yoshihiko Goto, Yoshiki Aritsu, Mako Toyoda, Toong Seng Tan, Mizuki Kitamatsu, Keiko Udaka, Pierre J Rizkallah, Hiroyuki Kishi, Andrew K. Sewell, Takamasa Ueno, Chihiro Motozono
Organizer
The 24th Kumamoto AIDS Seminar
Int'l Joint Research
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