2014 Fiscal Year Annual Research Report
新規ユビキチンリガーゼが関与するアルツハイマー病発症機構と根本治療薬の創製
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24300135
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
野村 靖幸 久留米大学, 医学部, 教授 (00034041)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金子 雅幸 岐阜薬科大学, 薬学部, 講師 (10322827)
大熊 康修 千葉科学大学, 薬学部, 教授 (20127939)
祖父江 元 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20148315)
北村 佳久 京都薬科大学, 薬学部, 准教授 (60195295)
友部 浩二 横浜薬科大学, 薬学部, 准教授 (80460286)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | アルツハイマー病 / ユビキチンリガーゼ / EDAD / APP / 神経細胞 / RNF1９B / Dorfin |
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| Outline of Annual Research Achievements |
私たちはこれまで、ERADに関与する新規のユビキチンリガーゼの中から、RNF19BおよびRNF19Bと相同性が高いDorfin（RNF19A）が、Aβの産生機構に関与することを見出し、γ-セクレターゼによるAPPの切断に関与することを明らかにしている。両ユビキチンリガーゼにおいて、一方のユビキチンリガーゼの発現を低下させると代償機構が働くことなく、APPの分解能が低下することが判明した。これらのことから、RNF19BおよびDorfinの両ユビキチンリガーゼが複合体を形成する可能性が考えられた。そこで、免疫染色法を用いて、マウス脳組織におけるRNF19BとDorfinの局在を確認したところ、両ユビキチンリガーゼは海馬および大脳皮質などの神経細胞に選択的に発現し、共局在していた。また、SH-SY5Y細胞におけるRNF19BとDorfinの局在を確認したところ、両ユビキチンリガーゼは小胞体に発現し、共局在していた。さらに、免疫沈降を行ったところ、RNF19BとDorfinが共沈したことから、両E3は複合体を形成していることが判明した。以上の結果より、RNF19BとDorfinは中枢の神経細胞において複合体を形成することで機能している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究分担者の金子が、平成２６年７月、広島大学への転任に伴い、計画中の実験に遅れが生じたことが主要な理由である。
さらに、E3タンパク質が非常に不安定で分解しやすく、検出が難しいという問題も発生したため、E3タンパク質の酸化ストレスによる機能低下に関する培養細胞を使用する実験でも諸種の予備検討を行うことが余儀なくされたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究分担者金子の広島大学での実験体制が整備されてきたので、遅れを取り戻すべく研究を鋭意進める。
E3タンパク質の酸化ストレスによる機能低下に関しては、E3タンパク質の修飾を行う代わりに、遺伝子レべルの機能低下で評価するよう検討する。
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| Causes of Carryover |
平成２６年７月に、当研究の研究分担者の金子が、岐阜薬科大学より広島大学に転任した。これに伴い、当初計画の研究のうち実施できない実験項目や遅れが生じた項目が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
金子との研究連絡、打ち合わせを密にするための旅費、および当初計画の実験項目の実施費用に充当する。
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