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2013 Fiscal Year Annual Research Report

ハイスループット細胞培養実験のためのマイクロウェル基盤MEMSデバイスの開発

Research Project

Project/Area Number 24300157
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

大橋 俊朗  北海道大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (30270812)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 前田 英次郎  北海道大学, 工学(系)研究科(研究院), 助教 (20581614)
Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords細胞培養実験 / マイクロウェルスライド / マイクロフルイディクス / バイオチップ / バイオMEMS
Research Abstract

従来の細胞の力学応答解析あるいは薬剤感度試験はミリメートルスケールの培養空間の中で行われてきたものが大勢であり,高価な細胞試料や試薬類などの多量使用の問題はもちろんのこと細胞の不均質性の評価など個々の細胞を詳細に解析するには細胞培養空間スケールと細胞寸法スケールに大きな隔たりがあり最適な実験環境とは言えない.そこで本研究の目的は,研究代表者らが開発してきたMEMSデバイス技術をさらに深化させ,細胞の物理環境計測・制御がマイクロメートルスケールの空間で実現できる多種多様なMEMSデバイスを開発することである.本年度は,開発を進めてきた細胞流れ負荷実験デバイスの開発,細胞薬剤感度実験デバイスの開発,細胞遊走実験デバイスの開発において,デバイスの改良にもう少し時間を必要したため,前年度の研究を引き続き平成25年8月まで継続するとともに,前年度に引き続き細胞培養実験を継続し本デバイスの有効性を確認した.その結果,細胞流れ負荷実験デバイスにおいては,異なる流れせん断応力を血管内皮細胞に負荷することにより細胞流れ負荷実験が可能であること,細胞薬剤感度実験デバイスにおいては異なる濃度のサポニンを内皮細胞に投与することにより薬剤濃度に対する感度実験が可能であること,細胞遊走実験デバイスにおいては繊維芽細胞の遊走時の牽引力ダイナミクスを計測することにより細胞遊走のメカニズムを力学的に検討できることを確認した.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究実績の概要で掲げた細胞流れ負荷実験デバイスの開発,細胞薬剤感度実験デバイスの開発および細胞遊走実験デバイスの開発はほぼ順調に行われてきており,現在デバイスの検証実験を重ねハイスループット細胞培養実験デバイスとして有効であることを確認しつつある.ただし,今後さらに実験を継続していく中で改良点があれば検討し柔軟に対応していく.

Strategy for Future Research Activity

これまでに開発を進めてきた,細胞流れ負荷実験デバイスの開発,細胞薬剤感度実験デバイスの開発および細胞遊走実験デバイスを用いて引き続き以下の研究項目を推進する.
1. 細胞流れ負荷実験デバイスの開発:引き続き細胞培養実験を継続しデータ数の増加に努める.特に形態変化に着目して異なる流れせん断応力に対する細胞応答観察を行う.また,マイクロウェル内底面に培養した細胞に層流を負荷するために,CFDによる流体解析を行い細胞周囲の流れ場を詳細に把握する.
2. 細胞薬剤感度実験デバイスの開発:引き続き細胞培養実験を継続しデータ数の増加に努める.試薬として細胞毒性のあるサポニンを利用し,細胞の生死判定により本デバイスの有効性を確認する.
3. 細胞遊走実験デバイスの開発:引き続き細胞培養実験を継続しデータ数の増加に努める.個々の細胞の経時的変化に着目し,集団細胞の遊走と個々の細胞の遊走を比較・検討する.
以上の実験をまとめ,最終年度のまとめとして学会発表ならびに論文発表を積極的に行う.

  • Research Products

    (10 results)

All 2014 2013

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] A microfluidic device towards shear stress analysis of clonal expanded endothelial cells2014

    • Author(s)
      E. Weibull, A. Matsui, H. Andersson-Svahn, T. Ohashi
    • Journal Title

      Journal of Biomechanical Science and Engineering

      Volume: 9 Pages: JBSE0006

    • DOI

      10.1299/jbse.2014jbse000X

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Microfluidic device for generating a stepwise concentration gradient on a microwell slide for cell analysis2013

    • Author(s)
      E. Weibull, A. Matsui, M. Sakai, H. Andersson-Svahn, T. Ohashi
    • Journal Title

      Biomicrofluidics

      Volume: 7 Pages: 064115

    • DOI

      10.1063/1.4846435

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] マイクロデバイスを用いた細胞バイオメカニクス解析2014

    • Author(s)
      大橋 俊朗
    • Organizer
      数学・数理科学と諸科学・産業との協働によるイノベーション創出のための研究推進プログラム
    • Place of Presentation
      明治大学(東京)
    • Year and Date
      20140226-20140228
    • Invited
  • [Presentation] A Microfluidic Device for Stepwise Concentration Generation on a Microwell Slide for Cytotoxic Assay2013

    • Author(s)
      T. Ohashi, E. Weibull, A. Matsui, M. Sakai, H. Andersson-Svahn
    • Organizer
      The 15th International Conference on Biomedical Engineering
    • Place of Presentation
      National University of Singapore (Singapore)
    • Year and Date
      20131204-20131207
  • [Presentation] マルチチャネルデバイスを用いた細胞遊走観察と牽引力計測2013

    • Author(s)
      大橋 俊朗, 菅原 章人, J. Cooper-White
    • Organizer
      日本機械学会M&M2013材料力学カンファレンス
    • Place of Presentation
      岐阜大学(岐阜市)
    • Year and Date
      20131011-20131014
  • [Presentation] Microdevices for Mechanical Characterization and Mechanical Responses of Cells2013

    • Author(s)
      T. Ohashi
    • Organizer
      International Symposium for the 70th Anniversary of the Tohoku Branch of the Chemical Society of Japan
    • Place of Presentation
      東北大学(仙台市)
    • Year and Date
      20130928-20130930
    • Invited
  • [Presentation] マイクロチャネルデバイスを用いた細胞遊走観察と牽引力計測2013

    • Author(s)
      大橋 俊朗, 菅原 章人, Justin Cooper-White
    • Organizer
      日本機械学会2013年度年次大会
    • Place of Presentation
      岡山大学(岡山市)
    • Year and Date
      20130909-20130911
  • [Presentation] A Microfluidic Device Generating Stepwise Concentrations Using a Microwell Slide for High-Throughput Cell Analysis2013

    • Author(s)
      T. Ohashi, E. Weibull, A. Matsui, M. Sakai, H. Andersson-Svahn
    • Organizer
      7th Asian Pacific Conference on Biomechanics
    • Place of Presentation
      KIST (Korea)
    • Year and Date
      20130829-20130831
  • [Presentation] Traction Force Measurement During Collective Cell Migration Measured by Multichannel Micropillar Device2013

    • Author(s)
      T. Ohashi, A. Sugawara
    • Organizer
      ASME 2013 11th International Conference on Nanochannels, Microchannels, and Minichannels
    • Place of Presentation
      北海道大学(札幌市)
    • Year and Date
      20130616-20130619
  • [Presentation] マイクロチャネルデバイスを用いた細胞遊走時の牽引力計測2013

    • Author(s)
      大橋 俊朗, 菅原 章人, J. Cooper-White
    • Organizer
      第36回日本バイオレオロジー学会年会
    • Place of Presentation
      九州大学西新プラザ(福岡市)
    • Year and Date
      20130606-20130608

URL: 

Published: 2015-05-28  

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