工業展開を指向した細胞表層提示の網羅的解析「Ｄｉｓｐｌｏｍｅ」の確立

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24360342
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 近藤 昭彦 神戸大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (40205547)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 荻野 千秋 神戸大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (00313693) ; 田中 勉 神戸大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (90436551) ; 松本 拓也 神戸大学, 学内共同利用施設等, 助教 (40727161)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 細胞表層提示 / バイオリファイナリー

Outline of Annual Research Achievements

前年度に引き続き、アンカータンパク質及び提示する酵素についての基盤技術を確立するための研究を進めた。本年度は、アンカータンパク質と酵素の組み合わせが活性及び増殖能に与える影響が大きいことを明らかにした。さらに、複数種類の酵素を複数種類のアンカータンパク質で提示するマルチディスプレイシステムの構築を進めた。アンカーと酵素の組み合わせをそれぞれ用いる場合、及びそれらを融合タンパク質として提示する場合について検討を行ったところ、融合タンパク質でも問題なく提示できることが新たに示された。これは微生物を用いたモノ作りにおいて、導入する遺伝子の数を少なくすることが可能である長所を持つ。さらに、これら表層提示した大腸菌を用いてオリゴ糖（セロビオース、及びキシロオリゴ糖）から物質生産を行った。試験管での培養でも物質生産に成功し、またフラスコやファーメンターなどを用いて生産能を向上させることにも成功した。さらに、培養条件を最適化することで、オリゴ糖からの増殖能をグルコースとほぼ同等にまで向上させることに成功した。これは、これまで表層に提示した酵素の活性が低く、そこが増殖の律速段階と思われてきたが、酵素活性は十分であるという新しい知見を得ることに成功した。これより、細胞内の代謝との関連性に関する条件を最適化することで、表層提示を用いた物質生産における生産能をさらに向上させる可能性を示された。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

26年度が最終年度であるため、記入しない。