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2014 Fiscal Year Annual Research Report

変異能力を有した培養B細胞株の機能拡張と抗体工学的活用

Research Project

Project/Area Number 24360343
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

金山 直樹  岡山大学, 自然科学研究科, 准教授 (70304334)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords細胞工学 / DT40 / AID
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、他の抗体作製技術で取得された任意のモノクローナル抗体の可変部や一本鎖抗体を、ヒトIgG1抗体定常部とのキメラ抗体としてニワトリB細胞株DT40の細胞表面に発現させることができ、かつ、DT40の変異能力によって親和性成熟できる革新的な動物細胞ディスプレーシステムを構築する。さらに、構造的に安定な変異抗体を発現する細胞の濃縮方法や、効率的な高親和性抗体産生細胞の選択方法を確立して、有用な活性を有した抗体創出の効率化を図る。
昨年度、ヒトモノクローナル抗体由来可変部遺伝子をDT40に導入して完全にヒト型の抗体を発現するDT40細胞の作製し、標的抗原に対する親和性の向上したクローンの単離に成功した。本年度は、ラマのモノクローナル抗体の可変部(VHH)をヒトIgG1 Fcとの融合タンパク質として発現させたDT40細胞を作製し、標的抗原に対する親和性の向上したクローンの単離に成功した。本研究によって、ヒトモノクローナル抗体、非抗体Fc融合タンパク質、一本鎖抗体Fc融合タンパクをDT40細胞にディスプレーし、改変する系を確立した。この系は、さまざまな実用的抗体なタンパク質の開発に有用であると考えられる。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (3 results)

All 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] CSF-1 receptor-mediated differentiation of a new type of monocytic cell with B cell-stimulating activity: its selective dependence on IL-342014

    • Author(s)
      Fumihiro Yamane, Yumiko Nishikawa, Kazue Matsui, Miki Asakura, Eriko Iwasaki, Koji Watanabe, Hikaru Tanimoto, Hiroki Sano, Yuki Fujiwara, E. Richard Stanley, Naoki Kanayama, Neil A. Mabbott, Masaki Magari, Hitoshi Ohmori
    • Journal Title

      Journal of Leukocyte Biology

      Volume: 95 Pages: 19-31

    • DOI

      10.1189/jlb.0613311

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 抗原レセプターシグナル依存性アポトーシス因子を抑制したニワトリB細胞株を用いた高親和性抗体の作製2014

    • Author(s)
      古賀 舞, 池田 美香, 小嶋 宏侑, 曲 正樹, 徳光 浩, 大森 斉, 金山 直樹
    • Organizer
      第37回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      2014-11-25
  • [Presentation] 変異能力を備えた B 細胞株を用いた抗体の機能改変2014

    • Author(s)
      金山 直樹 , 渡邊 康二 , 古賀 舞 , 川上 夏奈江 , 植月 英智 , 徳光 浩 , 曲 正樹 , 大森 斉
    • Organizer
      第66回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター
    • Year and Date
      2014-09-11

URL: 

Published: 2016-06-01  

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