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2012 Fiscal Year Annual Research Report

昆虫DNAウイルスに対するカイコの応答性防御機構の解析

Research Project

Project/Area Number 24380036
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Research InstitutionNational Institute of Agrobiological Sciences

Principal Investigator

田中 博光  独立行政法人農業生物資源研究所, 昆虫機能研究開発ユニット, 主任研究員 (30391577)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 坪田 拓也  (独)農業生物資源研究所, 遺伝子組換えカイコ研究開発ユニット, 任期付研究員 (00612772)
Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywordsカイコ / カイコ多角体病ウイルス / テトラスパニン / Etsファミリータンパク質 / テトラスパニン
Research Abstract

体内に侵入したDNAウイルスの排除あるいは増殖抑制機構を昆虫が有しているかはこれまでは全く不明であった。最近、カイコの転写因子であるBmBtsがカイコDNAウイルスであるBmNPVの応答性細胞内増殖抑制反応に関わる因子であることを見いだし、昆虫にもDNAウイルスに対する積極的な応答性防御機構があることを初めて見いだした。さらに、カイコ細胞へのノックダウン実験により細胞表面タンパク質であるテトラスパニンやインテグリンもBmNPVに対する感染・増殖抑制に関わっていることが示唆されている。
本年度はまずテトラスパニンがBmNPVに対する感染・増殖抑制に関わるかをさらに調べるため、テトラスパニンを過剰発現させたカイコ培養細胞にBmNPVを感染させ、一定時間後の細胞中のBmNPV量を測定した。その結果、細胞内のBmNPV量が有為に減少することが明らかとなった。さらに、テトラスパニンをカイコ培養細胞で過剰発現させた場合、BmNPVの前初期遺伝子のプロモーター活性が有為に減少した。このことから、テトラスパミンはBmNPV前初期遺伝子のプロモーター活性を抑制することで、細胞内のBmNPVの増殖を抑制していることが示唆された。
BmEtsはBmNPV前初期遺伝子プロモーター活性の抑制に関わっていることが示されている。カイコにはBmEts以外に少なくとも7種類のカイコEtsファミリータンパク質があることが推測されていることから、こうした他のEtsファミリータンパク質もBmNpv前初期遺伝子プロモーターの抑制あるいは活性化に関わっているかをノックダウン実験で調査した。その結果、ショウジョウバエのPointedのオーソログであるBmPTDがこの遺伝子プロモーターの抑制に関わっていることが示された。しかしながら、この遺伝子プロモーターを活性化するEtsファミリータンパク質を見いだすことはできなかった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ほぼ計画通りに進捗している

Strategy for Future Research Activity

当初の予定通りに推進する

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

研究用試薬やガラス・プラスチック器具等を効率的に使用した結果、研究費に余剰が生じた。
これらは次年度の研究費と合わせて、人件費や遺伝子発現解析実験に必要な試薬類、器具類の購入にあてる。

  • Research Products

    (1 results)

All 2013

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] カイコ培養細胞を用いたBmNPV感染応答遺伝子の機能解析2013

    • Author(s)
      勾坂晶,藤田幸輔,石橋純,田中博光
    • Organizer
      平成25年度蚕糸・昆虫機能利用学術講演会-日本蚕糸学会第83回大会
    • Place of Presentation
      農林水産技術会議事務局筑波事務所
    • Year and Date
      2013-03-19

URL: 

Published: 2014-07-16  

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