2014 Fiscal Year Annual Research Report
フグ毒のＭＲＩ三次元イメージング動態解析とフグ毒化関連分子の解明
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24380116
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| Research Institution | Tokyo University of Marine Science and Technology |
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Principal Investigator |
長島 裕二 東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 教授 (40180484)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永井 慎 岐阜医療科学大学, 保健科学部, 准教授 (30460497)
松本 拓也 県立広島大学, 生命環境学部, 助教 (30533400)
渡部 終五 東京大学, 農学生命科学研究科, 教授 (40111489)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 水産学 / 生体物質 / フグ / フグ毒 / テトロドトキシン / MRI |
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| Outline of Annual Research Achievements |
フグの毒化機構を、フグ毒テトロドトキシン（TTX）の体内動態と、毒化に関与する機能性分子の観点から解明するため、以下の項目を実施した。
１）MRIイメージング法によるTTXの体内動態解析：無毒の養殖トラフグに生理食塩水に溶解したTTXを0および1日目にそれぞれ2回ずつ筋肉投与した（総投与TTX量1.6mg）。最終投与後、60時間水槽で飼育後に水槽から取り出し、氷冷後、高磁場MRI測定に供した。対照魚には生理食塩水だけを投与したものを用い、TTXの特異的なプロトンスペクトラムにより選択的励起強調画像法で連続測定し、画像処理にて三次元表示した。その結果、TTX投与したトラフグでは、TTXは肝門脈から放射状に点在して分布することが初めて明らかになった。
２）フグ毒化関連分子の特定と機能解析：トラフグ肝臓に見いだされたTTX結合性物質を明らかにするため、組織培養法でTTXを蓄積させ、そのホモジネートをゲルろ過カラムに供すると高分子画分にTTXが検出された。また、無毒の養殖トラフグ肝臓の緩衝液抽出物にTTXを添加した場合にも高分子画分からTTXが検出され、TTXはトラフグ肝臓の高分子成分と結合することが明らかになった。
フグの毒化関与遺伝子の解析では、養殖トラフグにTTXを注射してTTXを蓄積させたとき肝臓で発現増大する遺伝子を、DNAマイクロアレイ法で解析した。その結果、TTXを蓄積したトラフグ肝臓では、代謝関連酵素やシグナル伝達系および免疫系タンパク質をコードする推定転写産物が高いレベルで発現増大した。また、養殖トラフグの肝組織切片を TTX含有培養液で24時間培養して次世代シーケンサーで遺伝子発現レベルを解析すると、TTX用量依存的な発現増大が観察された。GO解析およびKEGG解析の結果、ミトコンドリアに由来する転写産物が多く発現増大していることが確認された。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(14 results)
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[Journal Article] DNA microarray analysis on the genes differentially exprerssed in theliver of the pufferfish, Takifugu rubripes, following an intramuscular administration of tetrodotoxin2014
Author(s)
T. Matsumoto, H. Feroudj, R. Kikuchi, Y. Kawana, H. Kondo, I. Hirono, T. Mochizuki, Y. Nagashima, G. Kaneko, H. Ushio, M. Kodama, S. Watabe
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Journal Title
Microarrays
Volume: 3
Pages: 226-244
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] フグの安全性2015
Author(s)
長島裕二
Organizer
平成26年度神奈川県ふぐ包丁師衛生講習会
Place of Presentation
神奈川県横浜市
Year and Date
2015-03-12 – 2015-03-12
Invited
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