イノシトールリン脂質の分子種と生理機能に関する研究

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24390067
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 佐々木 純子 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30333371)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 細胞内シグナル伝達 / イノシトールリン脂質

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、細胞内セカンドメッセンジャーであるホスファチジルイノシトール-３,４,５-三リン酸（ＰＩＰ３）を、アシル基の観点から細分してとらえ、多種類であることを明示する。そのために、脂肪酸組成を含めたＰＩＰ３の解析技術を開発する。そしてＰＩＰ３代謝酵素欠損マウスやアシル基転移酵素欠損マウスを利用して、ＰＩＰ３分子種の動態変化と細胞機能変化とを包括して解析する。
本年度は、①ＰＴＥＮとＳＨＩＰ1のリコンビナントタンパク質を用いた脱リン酸化活性測定と②下流分子の同定を行った。①従来の方法では、複数のＰＩＰ３分子種を同一の試験管内で解析することはできない。そこで本研究部門で開発したＰＩＰｓ測定法を用いて、基質である複数のＰＩＰ３分子種の分解と反応生成物である複数のＰＩＰ２分子種の産生を同時に検出できる新たな測定系を構築した。この測定系を用いてＰＴＥＮとＳＨＩＰ1の脱リン酸化活性測定を行ったところ、ある条件下において両者は異なる活性を示すことを見出した。②ＰＴＥＮとＳＨＩＰ1の下流分子を特定するため、各々の欠損マウスの腹腔より細胞を調製し、ＰＨドメインを有する分子の活性化について解析した。その結果、ＰＴＥＮ欠損細胞とＳＨＩＰ1欠損細胞では異なる分子が活性化されることを見出した。ＰＴＥＮやＳＨＩＰ1を薬剤誘導性に過剰発現する細胞ではこれらの分子の活性化が減少すること、さらに、ＰＴＥＮやＳＨＩＰ1と下流分子とのダブルミュータントマウスは、ＰＴＥＮやＳＨＩＰ1単独欠損マウスの表現型を回復させることを見出した。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] INPP4B is a PtdIns(3,4,5)P3 phosphatase that can act as a tumor suppressor. (2015)
  • Author(s): Kofuji S, Kimura H, Nakanishi H, Nanjo H, Takasuga S, Liu H, Eguchi S, Nakamura R, Itoh R, Ueno N, Asanuma K, Huang M, Koizumi A, Habuchi T, Yamazaki M, Suzuki A, Sasaki J, Sasaki T.
  • Journal Title: Cancer Discovery Volume: in press Pages: 印刷中
  • DOI: in press
• [Journal Article] In vivo role of INPP4B in tumor and metastasis suppression through regulation of PI3K/AKT signaling at endosomes. (2015)
  • Author(s): Chew CL, Lunardi A, Gulluni F, Ruan DT, Chen M, Salmena L, Nishino M, Papa A, Ng C, Fung J, Clohessy JG, Sasaki J, Sasaki T, Bronson RT, Hirsch E, Pandolfi PP
  • Journal Title: Cancer Discovery Volume: in press Pages: 印刷中
  • DOI: in press
• [Journal Article] Loss of INPP4B causes a DNA repair defect through loss of BRCA1, ATM and ATR and can be targeted with PARP inhibitor treatment. Oncotarget. (2015)
  • Author(s): Ip LR, Poulogiannis G, Viciano FC, Sasaki J, Kofuji S, Spanswick VJ, Hochhauser D, Hartley JA, Sasaki T, Gewinner CA.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: in press Pages: 印刷中
  • DOI: in press
• [Journal Article] Dachsous-Dependent Asymmetric Localization of Spiny-Legs Determines Planar Cell Polarity Orientation in Drosophila. (2014)
  • Author(s): Ayukawa T., Akiyama M., Mummery-Widmer JL., Stoeger T., Sasaki J., Knoblich JA., Senoo H., Sasaki T., Yamazaki M.
  • Journal Title: Cell Rep. Volume: 8 Pages: 610-621
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2014.06.009.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Phosphatidic acid (PA)-preferring phospholipase A1 regulates mitochondrial dynamics. (2014)
  • Author(s): Baba T, Kashiwagi Y, Arimitsu N, Kogure T, Edo A, Maruyama T, Nakao K, Nakanishi H, Kinoshita M, Frohman MA, Yamamoto A, Tani K.
  • Journal Title: J. Biol. Chem. Volume: 289 Pages: 11497-11511
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.531921
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Very-long-chain polyunsaturated fatty acids accumulate in phosphatidylcholine of fibroblasts from patients with Zellweger syndrome and acyl-CoA oxidase1 deficiency. (2014)
  • Author(s): Abe Y, Honsho M, Nakanishi H, Taguchi R, Fujiki Y.
  • Journal Title: Biochim. Biophys. Acta Volume: 1841 Pages: 610-619
  • DOI: 10.1016/j.bbalip.2014.01.001
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] リピドミクスの分析技術と将来展望 (2014)
  • Author(s): 中西広樹
  • Journal Title: オレオサイエンス誌 Volume: 8 Pages: 321-327
  • DOI: none
• [Presentation] The class III PI3K and phosphatidylinositol 3-phosphate ensure structural and functional integrity of cardiomyocytes (2015)
  • Author(s): Hirotaka Kimura, Satoshi Eguchi, Junko Sasaki, Takehiko Sasaki
  • Organizer: the 120th Annual Meeting of The Japanese Association of Anatomists, the 92nd Annual Meeting of The Physiological Society of Japan
  • Place of Presentation: 兵庫
  • Year and Date: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [Presentation] The novel mechanism of tumor suppression by INPP4B (2015)
  • Author(s): Junko Sasaki, Satoshi Kofuji, Takahiro Kimura, Shunsuke Takasuga, Hiroki Nakanishi, Takehiko Sasaki
  • Organizer: 2nd International Symposium on Protein Modifications in Pathogenic Dysregulation of Signaling
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2015-01-23 – 2015-01-24
• [Remarks]
  • URL: http://www.med.akita-u.ac.jp/~bisei/