非翻訳領域リピート伸長脊髄小脳失調症のリピート不安定機構とＲＮＡ解析

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24390083
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 松浦 徹 自治医科大学, 医学部, 教授 (90402560)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: SCA36 / GGCCTGリピート伸長 / RNA foci / RNA結合タンパク

Research Abstract

脊髄小脳失調症36型(SCA36)の原因遺伝子変異は、nucleolar protein 56 (NOP56)遺伝子イントロン1に存在する非翻訳領域GGCCTGリピート伸長である(Kobayashi H, Abe K, Matsuura T, et al. Am J Hum Genet 2011))。患者リンパ芽球を用いて、RNA-FISHで核内GGCCUG RNA凝集物（RNA foci）検出に成功した。その核内局在を明らかにするため、 免疫蛍光法（IF）を組み合わせたFISH-IF法で、核膜 (抗Lamin B1抗体)、核小体(抗nucleolin抗体)、PML小体(抗PML抗体)、Cajal小体(抗Coilin抗体)、スプライシングスペックル(抗SC35抗体) 等との共局在をFISH-IFにより共焦点レーザー顕微鏡で観察した。GGCCUG RNA fociの局在は、スプライシングスペックルと一致していた。また、ゲルシフトアッセイ法によりGGCCUG結合タンパクとしてSRSF2というRNA結合タンパクが同定された。また、GGCCTG伸長変異の19bp下流にあるmiR1292発現が減少しており、FISH法でmiR1292がGGCCUG RNA fociに取り込まれているためと判明した。同じく非翻訳領域リピート伸長病であるSCA10、筋強直性ジストロフィー1型・2型（DM1・DM2）のリンパ芽球を用いて同様に比較解析したところ、それぞれのRNA fociの核内局在とRNA結合タンパクはそれぞれ異なり、分子病態メカニズムも異なることが示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

SCA36のGGCCUG fociの核内局在とGGCCUG-RNA結合タンパクを同定し、他の非翻訳領域リピート伸長病と比較検討できた。

Strategy for Future Research Activity

計画通り、他の非翻訳領域リピート伸長病である、SCA10、SCA31、脆弱X随伴振戦失調症候群 (Fragile X-associated tremor/ataxia syndrome: FXTAS) にも解析を展開し、それぞれのリピート不安定機構と複雑なRNA病態メカニズムを明らかにする。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

他の非翻訳領域リピート伸長病である、SCA10、SCA31、脆弱X随伴振戦失調症候群 (Fragile X-associated tremor/ataxia syndrome: FXTAS)の解析まで研究を展開し得なかった。
引き続きSCA10, SCA31, FXTASの解析にも着手し、比較解析も同時に進める。

Research Products

• [Journal Article] Myotonic dystrophy CTG expansion affects synaptic vesicle proteins, neurotransmission and mouse behaviour. (2013)
  • Author(s): Hernandez-Hernandez O, Guiraud-Dogan C, Sicot G, Huguet A, Luilier S, Steidl E, Saenger S, Marciniak E, Obriot H, Chevarin C, Nicole A, Revillod L, Charizanis K, Lee KY, Suzuki Y, Kimura T, Matsuura T, et al.
  • Journal Title: Brain Volume: 136 (Pt 3) Pages: 957－970
  • DOI: 10.1093/brain/aws367.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Exome sequencing as a diagnostic tool to identify a causal mutation in genetically highly heterogeneous limb-girdle muscular dystrophy. (2013)
  • Author(s): Matsuura T, Kurosaki T, Omote Y, Minami N, Hayashi YK, Nishino I, Abe K.
  • Journal Title: J Hum Genet Volume: 58 Pages: 564-565
  • DOI: 10.1038/jhg.2013.33.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Tissue Plasminogen Activator Thrombolytic Therapy for Acute Ischemic Stroke in 4 Hospital Groups in Japan. (2013)
  • Author(s): Kono S, Deguchi K, Morimoto N, Kurata T, Deguchi S, Yamashita T, Ikeda Y, Matsuura T, Narai H, Omori N, Manabe Y, Yunoki T, Takao Y, Kawata S, Kashihara K, Abe K.
  • Journal Title: J Stroke Cerebrovasc Dis Volume: 22 Pages: 190-196
  • DOI: 10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2011.07.016.
  • Peer Reviewed