2014 Fiscal Year Annual Research Report
無細胞蛋白質合成技術を活用した抗ＨＩＶ分子標的治療薬の創出
| Project/Area Number |
24390115
|
|---|
| Research Institution | Yokohama City University |
|---|
Principal Investigator |
梁 明秀 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20363814)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
|
| Keywords | ウイルス / 蛋白質 / プロテオーム / 酵素 / バイオテクノロジー |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では我々が独自に開発したコムギ無細胞蛋白質合成技術を駆使した蛋白質インタラクトームを活用し、内在性抗ウイルス宿主因子群と、それらを標的とするHIV-1アクセサリー蛋白質との相互作用を阻害する新規分子の同定を目指した研究を実施した。本年度はHIV-1アクセサリー蛋白質Vifによる抗ウイルス宿主因子APOBEC3G（A3G）のユビキチン化および分解を阻害する因子の探索を行った。我々の予備実験で、細胞にある種のストレスを与えるとVifの抗A3G活性が一時的に弱まることが分かっていたため、細胞外ストレスを感知する情報伝達蛋白質群に着目した結果、MAP3Kの１つであるASK1がVifの活性を阻害することが分かった。ASK1はVifのBC-Box領域に結合し、VifがA3Gをユビキチン化する際に必要な補助因子であるElongin B/Cの結合を阻止した。次に、ASK1のHIV-1複製に対する影響を調べるため、ASK1を過剰に発現させたT細胞株にHIV-1を感染させたところ、ウイルスの複製が顕著に阻害された。この細胞ではVifが存在するにも関わらず、細胞内のA3Gが分解されず、またウイルス遺伝子に多数の不活化変異が見出されたことから、ASK1はHIV-1感染細胞においてVifを阻害してA3Gの抗ウイルス活性を亢進させることが明らかとなった。また、抗HIV薬の一つであるアジドチミジン (AZT) がASK1の発現を増加させることを見いだした。AZTを添加したT細胞では、ASK1の発現上昇とともにVifの活性低下が見られた。このことから、AZTには本来の作用である逆転写阻害活性だけではなく、ASK1を介したVifの機能阻害という予想外の作用があることが明らかとなった。
|
| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Causes of Carryover |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
|
-
[Journal Article] ASK1 restores the antiviral activity of APOBEC3G by disrupting HIV-1 Vif-mediated counteraction.2015
Author(s)
Miyakawa K, Matsunaga S, Kanou K, Matsuzawa A, Morishita R, Kudoh A, Shindo K, Yokoyama M, Sato H, Kimura H, Tamura T, Yamamoto N, Ichijo H, Takaori-Kondo A, Ryo A.
-
Journal Title
Nature Communications
Volume: 6:6945
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
