2013 Fiscal Year Annual Research Report
キメラ抗原受容体導入発現γδＴ細胞による悪性胸膜中皮腫の免疫療法
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24390326
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
中島 淳 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (90188954)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
垣見 和宏 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (80273358)
村川 知弘 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (50359626)
松下 博和 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (80597782)
佐野 厚 東京大学, 医学部附属病院, 登録研究医 (20569834)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 免疫細胞治療 / γδT細胞 / メソテリン / CAR / メッセンジャーRNA / エレクトロポレーション(EP)法 / ACC-Meso4 / NOGマウス |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、難治性の疾患である胸膜中皮腫に対する抗原特異的免疫細胞治療を開発することである。末梢血から採取した患者の自己T細胞にメソテリン特異的受容体遺伝子（MesoCAR）を導入して悪性中皮腫細胞特異的なキラーT細胞へと改変し、再び患者に投与する。まず受容体の一過性発現が得られるメッセンジャーRNA(mRNA)を導入し臨床試験を実施し、安全性を確認した後レンチウイルスを用いた遺伝子導入を行う。
これまで、T細胞へのメソテリン特異的受容体（MesoCAR）導入技術を確立し、MesoCAR+T細胞のエフェクター機能解析を行った。今年度はNOD/Shi-scid,IL-2R-KO Jicマウス(通称NOGマウス)を用いた悪性中皮腫モデルの作製と移入治療に用いるMesoCAR+ T細胞の最適化を行った。モデルマウスに使用する細胞株を決定するため、NOGマウスに悪性中皮腫細胞株ACC-Meso1、ACC-Meso4、メソテリンのトランスフェクタントA431-mesoを接種し腫瘍の増殖を検討した。接種約５０日後に安定して腫瘍の増殖がみられたACC-Meso4をモデル腫瘍に選んだ。また、MesoCAR+ T細胞の最適化のため、γδT細胞を培養開始10、12、14日後でMesoCARmRNAの導入を行いCARの発現を比較検討したところ、発現の強さに差はなくいずれも３日間CARの発現が持続した。次に腫瘍細胞に対する反応性をインターフェロンγ産生と細胞傷害活性で比較検討したところ、10日目のMesoCAR+ γδT細胞が最も高かった。培養後に得られるγδT細胞数は10、12、14日後と順に増加したが、エフェクター機能が最も強かった10日目のMesoCAR+γδT細胞が治療に最適と考えられた。現在、ACC-Meso4担癌NOGマウスに10日目のMesoCAR+γδT細胞を投与する準備を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまでT細胞へのメソテリン特異的受容体（MesoCAR）導入技術を確立し、MesoCAR+ γδT細胞のエフェクター機能解析を行った。さらに悪性中皮腫モデルの作製と移入治療に用いるMesoCAR+ γδT細胞の最適化を行うことができた。速やかにin vivoの実験に移行可能である。
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| Strategy for Future Research Activity |
悪性中皮腫モデルの作製と移入治療に用いるMesoCAR+T細胞の最適化を行うことができたので、これにより個体レベルでMesoCAR＋T細胞の悪性中皮腫細胞株に対する抗腫瘍作用を検討することが可能である。NOGマウスにACC-Meso4を接種し50日経過した時点から、MesoCAR+ γδT細胞（T細胞培養10日目にMesoCARをEP法で導入）を3日おきにマウスに投与する。MesoCAR+ γδT細胞の腫瘍内への浸潤を検証し、浸潤MesoCAR+T細胞の機能、さらに抗腫瘍効果を検討する。得られた情報からMesoCAR+T細胞を用いた胸膜中皮腫に対する臨床研究のデザインを始めていく。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
最終収支計算をおこなったところ、１円の剰余があった。
可能ならば返納いたします。
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Research Products
(12 results)
