2014 Fiscal Year Annual Research Report
キメラ抗原受容体導入発現γδＴ細胞による悪性胸膜中皮腫の免疫療法
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24390326
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
中島 淳 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (90188954)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
垣見 和宏 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (80273358)
村川 知弘 東京大学, 医学部附属病院, 登録研究員 (50359626)
松下 博和 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (80597782)
佐野 厚 東京大学, 医学部附属病院, 登録診療員 (20569834)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 胸膜中皮腫 / 細胞移入治療 / γδT細胞 / αβT細胞 / メソテリン特異的受容体 / ＣＡＲ / NOGマウス、抗腫瘍効果 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、難治性の疾患である胸膜中皮腫に対し、末梢血から採取した患者の自己γδT細胞にメソテリン特異的受容体遺伝子（MesoCAR）を導入して悪性中皮腫細胞特異的なキラーT細胞へと改変し、再び患者に投与する細胞移入治療の開発である。
γδT細胞へのMesoCAR導入技術を確立した。次にNOD/Shi-scid,IL-2R-KO Jicマウス(通称NOGマウス)を用いた中皮腫モデルの作製と移入治療に用いるMesoCAR+ T細胞の最適化を行った。NOGマウスに接種する中皮腫のモデル腫瘍として、ACC-Meso1、ACC-Meso4、メソテリンのトランスフェクタントA431-mesoの中から、安定して腫瘍の増殖がみられたACC-Meso4を選んだ。移入治療に用いるMesoCAR+ T細胞は、細胞傷害活性が強く、十分な細胞量を確保できる培養開始10日目の細胞を使用した。
CARを導入する細胞として、一般的にはαβT細胞が使用される。したがって、MesoCAR+ γδT細胞の有効性を示すためには、MesoCAR+αβT細胞との比較が必要である。正常人の末梢血単核球を用いて、抗CD3/CD28抗体の刺激でαβT細胞を培養した。7日後にMesoCARの遺伝子導入を行った。In vitroにおいて、メソテリン陽性細胞に対するMesoCAR+ γδT細胞とMesoCAR+αβT細胞のサイトカイン産生能、細胞傷害活性を比較検討した。Meso-CARを導入したγδおよびαβT細胞は、ACC-MESO-4などのメソテリン発現細胞株を認識しIFN-γを産生したが、αβT細胞は同時にＴｈ２タイプのサイトカインであるIL-6、IL-10も産生した。in vitroにおいてMeso-CAR+ γδT細胞は、Meso-CAR+ αβ T細胞と同程度かそれより強い細胞傷害活性を示した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
今年度までに、移入治療に用いるMeso-CAR+ γδT細胞の最適化、そしてin vitroでのMeso-CAR+ γδT細胞と、Meso-CAR+ αβ T細胞のメソテリン発現細胞株に対する反応性を比較検討できた。また、NOGマウスに接種する悪性中皮腫のモデル腫瘍として、ACC-Meso1、ACC-Meso4、メソテリンのトランスフェクタントA431-mesoの中から、腫瘍接種後に安定して腫瘍の増殖がみられたACC-Meso4を選ぶことができた。
しかし、in vivoでのこれらの腫瘍モデルに対する Meso-CAR+ γδT細胞及び、Meso-CAR+ αβ T細胞の移入治療を実施することができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度に検討できなかったin vivoの検討を27年度において実施する。NOGマウスに接種する悪性中皮腫のモデル腫瘍として、ACC-Meso4以外のもうひとつのモデル腫瘍を探し、二つの細胞株でin vivoの検討を行う。まずは、CARを導入したγδT細胞（MesoCAR+γδT細胞）と、導入していないγδT細胞（MesoCAR-γδT細胞）の移入治療で腫瘍抑制効果を比較する。次に、MesoCAR+γδT細胞とMeso-CAR+ αβ T細胞の移入治療を行い、抗腫瘍効果を比較検討する。抗腫瘍効果とともに、腫瘍内のサイトカイン産生など免疫応答も検討し、さらに、正常組織に対するいわゆるoff-tumor/on-target toxicityも比較検討する。
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Research Products
(6 results)
