2015 Fiscal Year Annual Research Report
唾液腺の局所的再生をめざした分枝形態形成機構の探求
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24390452
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
阪井 丘芳 大阪大学, 歯学研究科(研究院), 教授 (90379082)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福本 恵美子 東北大学, 大学病院, 講師 (10264251)
野原 幹司 大阪大学, 歯学研究科(研究院), 准教授 (20346167)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 唾液腺 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
３次元的な立体構造を有する臓器を再生させるには障壁があり、未だに実現は困難とされている。本研究は、唾液腺をモデルとして、障害を受けた臓器の再生医療を行うことを目的としている。
1. 唾液腺形成時期に発現する遺伝子のスクリーニング：マウス胎仔の唾液腺上皮のcleft (分枝部) とbud (非分枝部)に特異的に発現する遺伝子を法で網羅的に同定した。そのデータベースから、分枝形態形成に重要な遺伝子を見いだすために、PROSITEを用いてタンパク質構造を推測し、特徴的な機能ドメインを有する遺伝子を選択してきた。
2. cleft上皮に特異的に発現する遺伝子の発現量確認：リストアップしたcleft上皮に特異的に発現する遺伝子を、RT-PCR法で確認した。
3. cleft上皮に特異的に発現する遺伝子の発現分布確認：in situ hybridizationを用いてmRNAレベルの発現分布、あるいは、既知の遺伝子であれば、既存する抗体を使用し免疫染色法を用いて、発現分布を確認する。cleft形成に関わる領域に発現しているかを検討し、新規遺伝子 Cleftinを発見した。
4. 器官培養を用いたRNA干渉 (siRNA)法による阻害実験：T7-SAGE法、RT-PCR法、in situ hybridization法あるいは免疫染色法にてその遺伝子がcleftに特異的に高く発現することが確証された場合は、siRNA法で機能的阻害実験を行い、分枝を制御しているかを検討している。
5. ３次元培養を用いた遺伝子細胞導入実験：上皮細胞に遺伝子を過剰発現させ、その遺伝子が分枝形態形成に関与しているか、他機能に関与しているかを検討している。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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