2012 Fiscal Year Annual Research Report
口腔癌関連microRNAの発現機能解析と臨床応用
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24390457
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
中城 公一 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (90314880)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 口腔癌 / microRNA |
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| Research Abstract |
近年、種々の癌においてその悪性形質に関与するmicroRNA(miRNA)が明らかにされている。そこで、本研究ではヒト口腔癌細胞の増殖に関与するmiRNAを探索した。ヒトmiRNA knockdownおよびoverexpression libraryをヒト口腔癌細胞に導入し、その細胞増殖活性を評価した。次に、細胞増殖に影響を与えるmiRNAの口腔癌組織における発現量をRT-PCR法にて定量し、さらにマイクロアレイ解析とIngenuity Pathway Analysisを用いて標的遺伝子を探索した。ヒトmiRNA918種類に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた網羅的機能阻害解析では、ヒト口腔癌細胞の増殖を支持するmiRNAとしてmiR-361-3PとmiR-133a/bを同定した.特に、miR-361-3pは正常口腔粘膜と比較して口腔扁平上皮癌組織において発現亢進が認められ、その標的遺伝子としてodd-skipped related 2を同定した。一方、ヒトmiRNA 1,000種類の模倣型合成miRNAを用いた網羅的過剰発現解析では、ヒト口腔癌細胞の増殖を抑制するmiRNAとしてmiR-629*とmiR-1289を同定した。これらmiRNAに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび模倣型合成miRNAは、口腔癌患者由来初代培養細胞に対しても著明な増殖抑制効果を示した。以上の結果は、ヒト口腔癌細胞の増殖を制御するmiRNAは存在し、これらは口腔癌の診断や治療に応用できる可能性を有している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ヒト口腔癌細胞ヌードマウス背部皮下移植腫瘍に対するmiRNAアンチセンスオリゴヌクレオチドの抗腫瘍効果が確認できない。合成miRNAやsiRNA同様に何らかの送達担体が必要である。アテロコラーゲンおよびリポソームを担体として用いる予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
miRNAアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび合成miRNAを生体内腫瘍に選択的に送達可能な担体を検討する。
また、miRNAの網羅的発現解析に次世代シーケンサーを用いる予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
われわれが今までに同定している全ての口腔癌関連miRNA(63種類)のヒト血清および唾液中の存在量をリアルタイム定量化RT-PCR法にて定量する。
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Research Products
(3 results)
