2014 Fiscal Year Annual Research Report
東南アジアの水環境における薬剤耐性菌の発生源と耐性獲得経路の推定
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24404017
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
渡部 徹 山形大学, 農学部, 准教授 (10302192)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
本多 了 金沢大学, 学内共同利用施設等, 助教 (40422456)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 薬剤耐性菌 / 大腸菌 / 水環境 / 耐性遺伝子 / 下水処理 / 病院排水 / 国際研究者交流 / タイ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【タスク１：チャオプラヤ川流域における抗生物質耐性菌の検索】バンコク市内の病院の下水から大腸菌を単離し，抗生物質耐性試験を実施した。ナリジクス酸（69%）とテトラサイクリン（76%）で高い耐性率が確認された。
【タスク２：耐性遺伝子の検出と遺伝情報にもとづく耐性菌発生源の推定】流域内34地点から分離された316株の大腸菌株に対して，PCR－RFLP法（H抗原遺伝子を対象とし，制限酵素Hinf IとRsa Iを使用した）による系統発生解析を行った。34地点は5つのクラスターに分けられた。
同じ大腸菌分離株から，4つの系列の抗生物質に対する38種類の耐性遺伝子を一斉検出したところ，24種類の遺伝子が検出された。ampC遺伝子の検出率が最も高く（約60％），ペニシリン系とテトラサイクリン系の耐性遺伝子で検出率が高かった。
耐性遺伝子の起源を推定するため，地点別の検出率とその周辺の土地利用の相関を調べたが，ごく限られたケースを除いて有意な相関は確認できなかった。続いて，各耐性遺伝子の検出率をクラスター別に比較したが，検出率には偏りがなく，大腸菌は流域内に十分に伝播した後で耐性遺伝子を獲得したことが示唆された。
【タスク３：各種発生源における耐性菌発生ポテンシャルの評価】活性汚泥リアクターを用いた模擬下水回分処理実験では，ノルフロキサシン（NOR）を0.01mg/L（病院排水レベル）で添加した系でNOR耐性大腸菌の割合が増加することが確認された。また，別の実験では，河川で見られる低濃度（数～50ng/L）での曝露でも，大腸菌の最小阻害濃度（MIC）が上昇した。
【タスク４：東南アジアの水環境における抗生物質耐性菌の発生源と耐性獲得経路の推定】明確な耐性獲得経路の推定までは至らなかったが，病院排水が同地域の有力な耐性菌発生源である事実と，河川中でも耐性の獲得が起こる可能性を示すことができた。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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