2014 Fiscal Year Annual Research Report
てんかんモデルラットを用いたてんかん発症の分子機構の解明
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24500399
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| Research Institution | National Center of Neurology and Psychiatry |
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Principal Investigator |
田谷 真一郎 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所・病態生化学研究部, 室長 (60362232)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | てんかん / 発達障害 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
イハラてんかんラット(IER)は、原因不明の自然発症ラット突然変異体である。このIERをてんかんのモデル動物として解析することで、てんかん発症の分子メカニズムを明らかにする。これまでに私共は、IERの原因遺伝子を同定することに成功し、遺伝子名をEpi-IERとした。そして、IERでEpi-IERのゲノムを調べた結果、イントロン上にSNPを見出した。このSNPにより、Epi-IERは転写の際にスプライシングに異常が生じ、発現が著しく低下することを明らかにした。
まず、IERでみられる神経細胞の形態異常がEpi-IERの過剰発現でレスキューできるか検討した。IER由来の海馬初代培養神経細胞にEpi-IER遺伝子を導入し、樹状突起の伸長や分岐を観察した結果、IERでみられる神経細胞の樹状突起の伸長阻害・分岐抑制はEpi-IERの過剰発現でレスキューできることを見出した。従って、IERの神経細胞の形態異常がEpi-IERの発現低下だけで説明できることを明らかにした。
次に、Epi-IERのシグナル伝達系の解析をするために、Epi-IERに結合する分子を免疫沈降法により精製し、液体クロマトグラフィーと質量分析による同定（ショットガン解析）を試みた。その結果、約500分子を同定した。ショットガン解析の問題点としては、同定した分子が直接結合するのか、あるいは複合体の一部の分子として間接結合するのかが不明である。今後、精製した蛋白質を用いてin vitroの結合実験を行う。Epi-IERと協調的に機能するEpi-IER結合分子を見出したなら、そのノックアウトマウスを入手する。表現型やてんかん誘発剤（GABAのアンタゴニスト）の投与により、Epi-IERノックアウトマウス／IERとの相同点を探す。以上のような取り組みで新規てんかん発症関連遺伝子を同定できると期待している。
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[Journal Article] Cytoskeletal regulation by AUTS2 in neuronal migration and neuritogenesis.2014
Author(s)
Hori K, Nagai T, Shan W, Sakamoto A, Taya S, Hashimoto R, Hayashi T, Abe M, Yamazaki M, Nakao K, Nishioka T, Sakimura K, Yamada K, Kaibuchi K, Hoshino M.
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Journal Title
Cell Report
Volume: 9
Pages: 2166-2179
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Temporal identity transition from Purkinje cell progenitors to GABAergic interneuron progenitors in the cerebellum.2014
Author(s)
Seto Y, Nakatani T, Masuyama N, Taya S, Kumai M, Minaki Y, Hamaguchi A, Inoue Y, Inoue T, Miyashita S, Fujiyama T, Yamada M, Chapman H, Campbell K, Magnuson M, Wright C, Kawaguchi Y, Ikenaka K, Takebayashi H, Ishiwata S, Ono Y, Hoshino M.
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Journal Title
Nature Communications
Volume: 5
Pages: 3337
DOI
Peer Reviewed
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