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2012 Fiscal Year Research-status Report

虚血性神経疾患に伴うミクログリア機能亢進と神経細胞死~pH感知性受容体の役割

Research Project

Project/Area Number 24500435
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Research InstitutionGunma University

Principal Investigator

佐藤 幸市  群馬大学, 生体調節研究所, 准教授 (00302498)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywordsプロトン感知性受容体 / G蛋白共役型受容体 / 脳虚血 / ミクログリア / 神経細胞 / 脳内炎症 / 細胞死 / 酸性ストレス
Research Abstract

中枢神経系のpH変化は神経機能に重篤な影響を及ぼすと考えられるが、そのメカニズムは依然不明である。本研究では、中枢での酸性ストレスに対するプロトン感知性(pH 7.6~6.0)のG蛋白共役型受容体(GPCR)の役割を探索する。また、プロトン感知性受容体が脳虚血や梗塞と関連したミクログリアの活性化に関与しているのか、神経の細胞死や神経機能にどのような影響を与えるのか明らかにするため、プロトン感知性受容体欠損マウスから調整した細胞を用いて解析している。本年度では、主に個体レベルでの解析を中心に酸性ストレスに対するプロトン感知性GPCRの役割を探索した。
(1)RT-qPCRで前脳組織におけるプロトン感知性GPCRサブタイプを調べ、OGR1、GPR4とTDAG8の発現を確認した。また、前脳虚血手術を施した後、TUNEL染色にて神経細胞の細胞死や細胞特異的なマーカーにて染色を行いミクログリアの活性化を検出する条件決めを行った。今後、炎症性サイトカインの発現解析と合わせて生体におけるプロトン感知性GPCRの役割を明らかにする。
(2)インビボ実験と平行してマウスのミクログリアを調整して細胞外酸性pH応答の作用を調べたところ、酸性pHはLPSによる炎症性サイトカイン(IL-1β)産生を抑制した。一方、N1E115神経細胞において酸性pHによるカルシウム動員や細胞生存活性能の亢進を観察した。今後、これらのメカニズムを解析することによって、プロトン感知性GPCRサブタイプの役割を明らかにする。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成24年度では、主に個体レベルでの解析を中心に酸性ストレスに対するプロトン感知性GPCRの役割を探索した。RT-qPCRで前脳組織におけるプロトン感知性GPCRサブタイプを調べ、OGR1、GPR4とTDAG8の発現を確認した。また、前脳虚血手術を施した後、TUNEL染色にて神経細胞の細胞死や細胞特異的なマーカーにて染色を行いミクログリアの活性化を検出する条件決めを行った。しかし、プロトン感知性GPCR欠損マウスを用いての解析まで至らなかった。今後、このような未解決の項目を優先的に本課題を継続して行う。

Strategy for Future Research Activity

生体での酸性ストレスに対するプロトン感知性GPCRの役割を探索するため、マウスの前脳虚血モデルを用いて24年度で未解決の項目に関して継続して行う。また、プロトン感知性GPCRが、脳虚血や梗塞と関連したミクログリアの活性制御に関与しているのか、ミクログリアの炎症性サイトカイン産生とpH感知性受容体の関連性を解析する。さらに、プロトン感知性GPCRが、神経細胞に及ぼす酸性ストレスの直接的な影響とその細胞内シグナル機構を解析する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

該当なし

  • Research Products

    (8 results)

All 2012 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results) Remarks (3 results)

  • [Journal Article] An orally active lysophosphatidic acid receptor antagonist attenuates pancreatic cancer invasion and metastasis in vivo.2012

    • Author(s)
      Mayumi Komachi
    • Journal Title

      Cancer Sci.

      Volume: 103 Pages: 1099-1104

    • DOI

      10.1111/j.1349-7006.2012.02246.x

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Deficiency of proton-sensing ovarian cancer G protein-coupled receptor 1 attenuates glucose-stimulated insulin secretion.2012

    • Author(s)
      Takashi Nakakura
    • Journal Title

      Endocrinology

      Volume: 153 Pages: 4171-4180

    • DOI

      10.1210/en.2012-1164

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] N1E115神経細胞における細胞外酸性pHによる細胞内Ca2+動員、Aktリン酸化とプロトン感知性受容体の関与2012

    • Author(s)
      佐藤幸市
    • Organizer
      第85回日本生化学会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡県)
    • Year and Date
      20121214-20121216
  • [Presentation] Involvement of TDAG8 in extracellular acidification-induced inhibition of interleukin-1β production in microglia.2012

    • Author(s)
      Ye Jin
    • Organizer
      第85回日本生化学会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡県)
    • Year and Date
      20121214-20121216
  • [Presentation] ヒト膵臓がん細胞の浸潤・転移に対する経口可能なリゾホスファチジン酸受容体アンタゴニストKi16198の抑制作用2012

    • Author(s)
      佐藤幸市
    • Organizer
      第54回日本脂質生化学会
    • Place of Presentation
      九州大学医学部百年講堂(福岡県)
    • Year and Date
      20120607-20120608
  • [Remarks] 国立大学法人 群馬大学

    • URL

      http://www.gunma-u.ac.jp/index-j.html

  • [Remarks] 群馬大学生体調節研究所

    • URL

      http://imcr.showa.gunma-u.ac.jp/

  • [Remarks] 群馬大学生体調節研究所シグナル伝達分野

    • URL

      http://www.imcr.gunma-u.ac.jp/lab/sigtra/

URL: 

Published: 2014-07-24  

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