劣化脂質による胆道がん発症機構とその制御に関する検討

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24500977
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 田妻 進 広島大学, 大学病院, 教授 (80201614)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 胆管 / リゾリン脂質 / 膵胆管合流異常 / 胆管癌 / アポトーシス / 炎症性サイトカイン / 細胞老化

Outline of Annual Research Achievements

ヒト不死化胆管上皮細胞株MMNK-1にLPCを添加し、細胞増殖能、ROS産生、脂質過酸化、8-OHdG発現定量による酸化的DNA傷害、DNAメチル化を評価するとともにマイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を行った。細胞老化はp16,p21の発現とSA-β-gal活性で評価し、SASP因子はqPCR, cytokine assayにて遺伝子・蛋白発現を解析した。その結果、LPCは胆管上皮細胞に対し細胞障害作用を示し、抗酸化剤N-acetylcysteine(NAC)の併用で細胞生存率は有意に改善した。さらにLPCは濃度・時間依存的にROS産生を誘導し、これらはNACの併用で抑制された。またmalondialdehydeの有意な増加を認めたことから、これらの酸化ストレスに伴い、8-OHdGの産生も有意に増加し、酸化的DNA傷害が惹起されることが示唆された。さらにトータルゲノムのDNAメチル化は胆管癌細胞株であるHuCCT-1と同程度まで低下していた。マイクロアレイによる遺伝子発現変化の検討では、LPC刺激によりIL-8, IL-6をはじめとするSASP因子の発現誘導を認めた。このため、LPCによる細胞老化を評価したところSA-β-gal活性の有意な上昇を認め、p16, p21の遺伝子発現も有意な発現誘導を認めた。さらに代表的なSASP因子の発現・分泌を検討したところ、有意な誘導が認められた。
以上より、LPCは胆管上皮細胞に対し酸化ストレスを介して細胞老化を誘導し、SASP因子の産生により周囲の微小環境に影響を与えることで発癌に寄与していることが示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Cholangiocyte senescence caused by lysophosphatidylcholine as a potential implication in carcinogenesis. (2015)
  • Author(s): Shimizu R, Kanno K, Sugiyama A, Ohata H, Araki A, Kishikawa N, Kimura Y, Yamamoto H, Kodama M, Kihira K, Tazuma S.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci. Volume: 22 Pages: in press
  • DOI: 10.1002/jhbp.256. [Epub ahead of print]
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Classification of biliary tract cancers established by the Japanese Society of Hepato-Biliary-Pancreatic Surgery: 3(rd) English edition. (2015)
  • Author(s): Miyazaki M, Ohtsuka M, Miyakawa S, Nagino M, Yamamoto M, Kokudo N, Sano K, Endo I, Unno M, Chijiiwa K, Horiguchi A, Kinoshita H, Oka M, Kubota K, Sugiyama M, Uemoto S, Shimada M, Suzuki Y, Inui K, Tazuma S, Furuse J, Yanagisawa A, Nakanuma Y, Kijima H, Takada T.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci. Volume: 22 Pages: 181-196
  • DOI: 10.1002/jhbp.211. Epub 2015 Feb 17.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Report on the 2013 national cholelithiasis survey in Japan. (2015)
  • Author(s): Tazuma S, Kanno K, Kubota K, Tsuyuguchi T, Kamisawa T, Isayama H, Nakagohri T, Inui K; Academic Committee of the Japan Biliary Association.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci. Volume: 22 Pages: 392-395
  • DOI: 10.1002/jhbp.206. Epub 2015 Jan 18.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The mechanism of increased biliary lipid secretion in mice with genetic inactivation of bile salt export pump. (2015)
  • Author(s): Gooijert KE, Havinga R, Wolters H, Wang R, Ling V, Tazuma S, Verkade HJ.
  • Journal Title: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. Volume: 308 Pages: G450-G457
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00391.2014. Epub 2014 Dec 31.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Clinical profiles of patients with primary sclerosing cholangitis in the elderly. (2015)
  • Author(s): Tanaka A, Tazuma S, Okazaki K, Tsubouchi H, Inui K, Takikawa H.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci. Volume: 22 Pages: 230-236
  • DOI: 10.1002/jhbp.194. Epub 2014 Nov 19.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant