2013 Fiscal Year Research-status Report
悪性胸膜中皮腫のプロテオーム解析による分子標的治療の開発
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24501352
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
藏滿 保宏 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50281811)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上田 和弘 山口大学, 医学部附属病院, 講師 (90420520)
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| Keywords | 悪性胸膜中皮腫 / プロテオミクス |
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| Research Abstract |
悪性胸膜中皮腫は胸膜の中皮細胞に由来する悪性腫瘍である。過去に職場や日常生活においてアスベストに暴露し、現在悪性胸膜中皮腫に罹患している患者は増加の一方であり、診断時にすでに広範囲に進展し根治手術が不可能であることが多く、化学療法のみでの治療の場合ペメトレキセドとシスプラチンの併用である程度の効果をあげているものの有効とは言えず、予後はきわめて不良である。そこで申請者がこれまで培ってきたプロテオミクスの技術を駆使して治療の標的となるタンパクを同定し、標的タンパクに照準を合わせた治療法の開発を目的とする。
昨年の段階では、プロテオーム解析の結果HSP70、GRP78、PDX 2、protein disulfide isomerase A3、 annexin A3、14kDa phosphohistidine phosphataseの発現が正常胸膜中皮細胞と比較して増強していることが明らかとなっていたが、今回特異抗体を用いたウェスタンブロットの結果、同定された蛋白質の中でHSP70とGRP78の発現が悪性胸膜中皮腫細胞において増強していることを確立することができた。現在HSP70とGRP78の特異的なsiRNAを用いてのノックダウンを行い、ノックダウンによって悪性中皮腫細胞の増殖、浸潤、遊走にどのような影響があるのかを調べている最中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
悪性胸膜中皮腫細胞のプロテオーム解析の結果同定された蛋白質の特異抗体を用いての確認工程は既に終了しており、確認がとれたHSP70とGRP78のノックダウンによる悪性胸膜中皮腫細胞の増殖、浸潤、遊走への影響を調べる段階となっているが、デザインしたsiRNAの機能がはっきりしておらずノックダウンが成功していない。そのため、まだHSP70とGRP78の中皮腫細胞の悪性度への影響が確認できていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
候補蛋白であるHSP70とGRP78のノックダウンを完了して悪性胸膜中皮腫細胞への影響を確認することが第一である。そのため、HSP70とGRP78のsiRNAのデザインを再度行って実際に機能的なsiRNAを使用できるようにする。
また、昨年悪性胸膜中皮腫細胞での強発現が確認できたDDX39にも焦点を絞って、ノックダウンによって増殖、浸潤、遊走への影響を調べる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
プロテオーム解析によって悪性胸膜中皮腫細胞に特異的に強発現している蛋白質として同定されたHSP70とGRP78のノックダウンが成功していないことから次年度使用額が生じた理由である。
HSP70とGRP78のsiRNAを再デザインしてノックダウンを成功させ、同定されたHSP70とGRP78の悪性胸膜中皮腫の増殖、浸潤、遊走における役割を明らかにするための消耗品で使用する予定である。（１）siRNAとノックダウンのための試薬一式（２）MTSアッセイ用試薬（３）マトリジェルとトランスウェル
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Research Products
(19 results)
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[Journal Article] Fascin regulates chronic inflammation-related human colon carcinogenesis by inhibiting cell anoikis.2014
Author(s)
Kanda, Y., Kawaguchi, T., Kuramitsu, Y., Kitagawa, T., Kobayashi, T., Takahashi, N., Tazawa, H., Habelhah, H., Hamada, J., Kobayashi, M., Hirahata, M., Onuma, K., Osaki, M., Nakamura, K., Kitagawa, T., Hosokawa, M. and Okada, F.
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Journal Title
Proteomics
Volume: 14 (9)
Pages: 1031-1041
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Proteomic Analysis Indicates that Overexpression and Nuclear Translocation of Lactoylglutathione lyase (GLO1) is Associated with Tumor Progression in Murine Fibrosarcoma.2014
Author(s)
Wang, Y., *Kuramitsu, Y., Tokuda, K., Okada, F., Baron, B., Akada, J., Kitagawa, T. and Kazuyuki Nakamura, K.
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Journal Title
Electrophoresis
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Human pancreatic cancer cells with acquired gemcitabine resistance exhibit significant up-regulation of peroxiredoxin-2 compared to sensitive parental cells.2013
Author(s)
Suenaga S, Kuramitsu Y, Wang Y, Baron B, Kitagawa T, Akada J, Tokuda K, Kaino S, Maehara S, Maehara Y, Sakaida I, Nakamura K.
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Journal Title
Anticancer Res
Volume: 33(11)
Pages: 4821-4826.
Peer Reviewed
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[Journal Article] Chronic inflammation-derived nitric oxide causes conversion of human colonic adenoma cells into adenocarcinoma cells.2013
Author(s)
Tazawa H, Kawaguchi T, Kobayashi T, Kuramitsu Y, Wada S, Satomi Y, Nishino H, Kobayashi M, Kanda Y, Osaki M, Kitagawa T, Hosokawa M, Okada F.
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Journal Title
Exp Cell Res.
Volume: 319(18)
Pages: 2835-2844
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] A new type of protein chip to detect hepatocellular carcinoma-related autoimmune antibodies in the sera of hepatitis C virus-positive patients.2013
Author(s)
Akada J, Kamei S, Ito A, Ito M, Kitagawa T, Furumoto H, Kato Y, Tamesa M, Takashima M, Shirai M, Yamano H, Oka M, Kuramitsu Y, Nakamura K.
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Journal Title
Proteome Sci.
Volume: 11(1)
Pages: 33
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Proteomics analysis of human malignant pleural mesothelioma cells compared to normal mesotherial cells.2013
Author(s)
Kuramitsu, Y., Tominaga, W., Baron, B., Kitagawa, T., Akada, J. and Nakamura, K.
Organizer
HUPO 12th Annual World Congress
Place of Presentation
Yokohama（パシフィコ横浜）
Year and Date
20130914-20130918
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[Presentation] Proteomics analysis displays overexpression of Lactoylglutathione (GLO1) is associated with tumor progression in murine fibrosarcoma.2013
Author(s)
Wang. Y., Kuramitsu, Y., Tokuda, K., Ueno, T., Nakamura, K., Suzuki, N., Yoshino, S., Iizuka, N., Akada, J. and Oka, M.
Organizer
HUPO 12th Annual World Congress
Place of Presentation
Yokohama（パシフィコ横浜）
Year and Date
20130914-20130918
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[Presentation] Immuno-proteomics of Helicobacter pylori antigens for IgG antibodies in H. pylori-positive Japanese child sera.2013
Author(s)
Akada, J., Okuda, M., Fukuda, Y., Kitagawa, T., Kuramitsu, Y. and Nakamura, K.
Organizer
HUPO 12th Annual World Congress
Place of Presentation
Yokohama（パシフィコ横浜）
Year and Date
20130914-20130918
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[Presentation] Protein chip methodology to detect HSP70 autoimmune antibodies in the sera of hepatitis C virus-positive hepatocellular carcinoma patients.2013
Author(s)
Akada, J., Kamei, S., Ito, A., Kitagawa, T., Oka, M., Kuramitsu, Y. and Nakamura, K.
Organizer
HUPO 12th Annual World Congress
Place of Presentation
Yokohama（パシフィコ横浜）
Year and Date
20130914-20130918
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