2013 Fiscal Year Research-status Report
ＧＦＰマーキングを用いた食品アレルギーにおけるＩＬー５産生細胞の挙動・機能解析
| Project/Area Number |
24580196
|
|---|
| Research Institution | Dokkyo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
橋口 昌章 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (20372443)
|
|---|
| Keywords | アレルギー / IL-5 / 好酸球 / GFP / マーキング |
|---|
| Research Abstract |
食品アレルギーは，近年増加の一途をたどり，その予防・治療方法の開発は急務となっている．その発症には，IL-4のみならず，好酸球が重要であり，好酸球の分化・増殖を担うIL-5の発現調節機能の解明は食品アレルギーをはじめとするアレルギー疾患の制御へつながる．しかしながら、これまで，どういった細胞が主たるIL-5産生細胞であるかは明らかとなっていなかった．そこで，本研究では，IL-5産生細胞をGFPにてマーキングすることにより，in vivoでのIL-5産生細胞を可視化し，その挙動・機能を解析することを目的とした．
初年度に樹立した，IL-5プロモーター制御下でGFPを発現するBACトランスジェニックマウスをもちいて，IL-5産生細胞 (GFP陽性細胞) の同定・表現型の解析を行った．このマウスの，脾臓，リンパ節，小腸といったリンパ組織および肺より調製した細胞はGFP陽性細胞の比率は低かったが，脂肪組織より調製した細胞においてはGFP陽性細胞の割合が高かった．このGFP陽性細胞は，一部はT細胞であったが，多くは，系統マーカー陰性の，最近見いだされたInnate Lymphoid cell (ILC, 自然リンパ球) であった．この細胞は，CD90, Sca-1, IL-7Rα, CD25, IL-33Rα, ICOSを発現し，典型的なグループ2 ILCの表現型を示していた．得られた結果は，次年度に行う，IL-5産生細胞の機能解析において重要な知見と考えられた．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
遺伝子改変マウスの樹立に成功し，そのマウスにおいて、期待するGFP発現も確認できている．また，当初の計画通り，GFP陽性細胞の表現型まで解析できている．
|
| Strategy for Future Research Activity |
樹立したIL-5-GFPトランスジェニックマウスをもちいて，IL-5産生細胞の機能について解析を行う．IL-5産生細胞 (GFP陽性細胞) をセルソーターをもちいて単離し，遺伝子発現を解析するとともに，単離した好酸球へ与える影響について検討する．
|
| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
試薬が複数点キャンペーン価格で購入できたため．
一部をマウスの保存等にその他として使用する．残りは試薬，プラスチック器具等，消耗品として使用する．
|
