細胞性およびウイルス性蛋白質の細胞内分解・成熟機構

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24590103
• Research Institution: Kyoto Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 藤室 雅弘 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (20360927)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: ウィルス / ヘルペスウイルス / プロテアーゼ / がん / 抗ウイルス薬 / 抗腫瘍薬 / シグナル伝達

Outline of Annual Research Achievements

カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV)は、感染者の免疫不全時にカポジ肉腫やB細胞性リンパ腫を引き起こす。KSHVは健常人に感染すると2本鎖環状DNAとなり細胞核内で潜伏感染する。潜伏感染時に、KSHVは潜伏感染関連核抗原（LANA)を発現し、LANAはウイルスDNAの維持を行うとともに、感染細胞の発がんに関与する。
過去に実施した研究により、LANAは脱ユビキチン化酵素(HAUSP/USP7)と結合し、HAUSPにより脱ユビキチン化され安定化され、安定化したLANAはKSHVゲノムの維持・安定化を亢進させることを我々は見出している。さらに、LANAは細胞性プロテアーゼにより一箇所切断を受け30kDaの安定なC末端断片(LANA-C)を生成することを明らかにしている。このLANA-Cはミトコンドリア蛋白質のp32前駆体と結合してp32の成熟を阻害する。本年度の研究において、LANAの切断を触媒する細胞性プロテアーゼ（プロセッシング酵素）の特徴付けと同定を実施した。LANAの切断部位を含む合成ペプチドを基質として用い、陰イオン交換クロマトグラフィーとゲル濾過によりLANA切断酵素の部分精製を行った結果、切断酵素は分子量30ｋDaのセリンプロテアーゼであることが明らかになった。また、このLANA切断酵素はアポトーシスにより活性化することも見出した。現在、本酵素の完全精製とMSによる同定を行っている。さらに、KSHV関連腫瘍を標的とした抗腫瘍化合物と抗KSHV化合物の探索を実施した結果、ERストレス誘導剤のジアシルトリスルフィドとC60フラーレン誘導体はKSHV感染B細胞性リンパ腫に対する抗腫瘍活性を有することを見出した。

Research Products

• [Journal Article] Pyrrolidinium fullerene induces apoptosis by activation of procaspase-9 via suppression of Akt in primary effusion lymphoma. (2014)
  • Author(s): Watanabe T, Nakamura S, Ono T, Ui S, Yagi S, Kagawa H, Watanabe H, Ohe T, Mashino T, Fujimuro M
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. Volume: 451 Pages: 93-100
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.07.068.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Notch-Nrf2 axis: Regulation of Nrf2 gene expression and cytoprotection by Notch signaling. (2014)
  • Author(s): Wakabayashi N, Skoko JJ, Chartoumpekis DV, Kimura S, Slocum SL, Noda K, Palliyaguru DL, Fujimuro M, Boley PA, Tanaka Y, Shigemura N, Biswal S, Yamamoto M, Kensler TW.
  • Journal Title: Mol. Cell. Biol. Volume: 34 Pages: 653-663
  • DOI: 10.1128/MCB.01408-13.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Sangivamycin induces apoptosis by suppressing Erk signaling in primary effusion lymphoma cells. (2014)
  • Author(s): Wakao K, Watanabe T, Takadama T, Uia S, Shigemi Z, Kagawa H, Higashi C, Ohga R, Taira T, Fujimuro M
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. Volume: 444 Pages: 135-140
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.01.017.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Diallyl trisulfideのNF-κBシグナル抑制を介した抗腫瘍効果 (2014)
  • Author(s): 重見 善平, 古川 喜規, 賀川 裕貴, 渡部 匡史, 藤室 雅弘
  • Organizer: 第87回日本生化学会大
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2014-10-18 – 2014-10-18
• [Presentation] K+イオノフォアNigericin はカポジ肉腫関連ヘルペスウイルス感染リンパ腫細胞のWnt シグナルを抑制しアポトーシスを誘導する (2014)
  • Author(s): 梅山 遥、重見善平、渡部匡史、賀川裕貴、藤室雅弘
  • Organizer: 第64回日本薬学会近畿支部総会・大会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2014-10-11 – 2014-10-11
• [Remarks] 京都薬科大学細胞生物学HP
  • URL: http://labo.kyoto-phu.ac.jp/cellbiology/