2015 Fiscal Year Annual Research Report
薬物結合抗体の動態関連分子結合性が細胞内・体内動態に及ぼす影響の解明
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24590229
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| Research Institution | National Institute of Health Sciences |
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Principal Investigator |
鈴木 琢雄 国立医薬品食品衛生研究所, 生物薬品部, 主任研究官 (10415466)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 薬物結合抗体（抗体薬物複合体） / 動態 / 受容体親和性 / 抗原親和性 / FcRn / FcγR / イメージング / 安全性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
薬物結合抗体（抗体薬物複合体：ADC）は細胞傷害性の強い低分子薬物が結合されているため、有効性・安全性確保には適切な薬物放出を含めた動態の制御が重要である。しかし、薬物結合状態が異なることによる結合特性（FcRn、FcγR等の受容体結合性や抗原結合性）の変化と、細胞内・体内動態への影響には不明な点が多く、安全性上懸念が残る。本研究では、このような不明点を明らかにするための手法の確立、及び確立した手法を用いた解析を実施した。
標的細胞への薬物輸送に用いることが可能な抗HER2抗体と抗EGFR抗体等に、化合物として各種蛍光色素やビオチンを結合させADCモデルを作製した。表面プラズモン共鳴法を用いた解析法を確立し、作製したADCモデルについて、FcRn、FcγR、抗原結合性への影響を調べたところ、化合物の結合部位（リシン残基、システイン残基）に関わらず、多くのケースで影響が認められた。また、蛍光色素を結合させたADCモデルを評価し、細胞内動態解析に適切と考えられる蛍光色素を選択した。動態解析法としては、抗体に2種類の蛍光色素を組み合わせて結合したFRET型ADCモデルを作製し、共焦点レーザー顕微鏡を用いたacceptor photobleaching法や動物用イメージング装置を用いたspectral unmixing法で評価することにより、動態と化合物放出性（抗体の分解による化合物放出）を評価可能であると考えられた。なお、最終年度は適切であると考えられた条件で作製したADCモデルについて細胞内動態解析等を行った。
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