2014 Fiscal Year Annual Research Report
哺乳類の減数分裂チェックポイントにおけるリン酸化シグナル
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24590263
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
向後 寛 群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20282387)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 減数分裂 / 不妊 / ノックアウトマウス / 性染色体 / 転写抑制 / リン酸化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度の解析により、それまで不明だった対合不全によって誘導されるHORMAD1のリン酸化部位を同定することができたが（学会発表済）、他のグループのプロテオーム解析の結果から、このリン酸化部位の近傍に別のリン酸化が同時に起こる可能性が示されており、この部位に”リン酸化クラスター”が形成されていると考えられた。従って、これまで行ってきた１ヶ所のリン酸化に対する特異的ポリクローナル抗体による解析では、HORMAD1の実際のリン酸化状態を把握するには不十分であったと考え、近傍のリン酸化状態を含めて検出できる特異的モノクローナル抗体の作製を試みた。その結果、１ヶ所リン酸化型HORMAD1に特異的な抗体と、２ヶ所リン酸化型HORMAD1に特異的な抗体をそれぞれ作製することができた。これらの抗体を用いた精母細胞染色体標本の蛍光抗体染色により、１ヶ所目のリン酸化がDNA切断の有無にかかわらず、減数分裂の初期から非対合部分の染色体軸上のHORMAD1に見られたのに対し、２ヶ所目のリン酸化は、対合が完了した時期の性染色体や、SPO11欠損によりDNA切断が存在せず多数の対合不全を生じた際に形成される転写抑制ドメインに含まれる染色体上に特異的に検出されることが明らかになった（未発表）。これらの結果は、HORMAD1の限局した部位において、異なるキナーゼによる多段階のリン酸化が起こることを示唆しており、このリン酸化部位に結合する因子の同定や、その機能的意義の解析を行う上で非常に重要な基礎的データである。また、当初の目標であったリン酸化部位に結合する因子やリン酸化を行うキナーゼの同定は未達成であるが、特異的モノクローナル抗体を作製しリン酸化状態をより正しく同定することは、今後の研究をより着実に進める上で不可欠であると考えている。
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] Requirement of DLG1 for Cardiovascular Development and Tissue Elongation during Cochlear, Enteric, and Skeletal Development: Possible Role in Convergent Extension.2015
Author(s)
Akiko Iizuka-Kogo, Takao Senda, Tetsu Akiyama, Atsushi Shimomura, Ryuji Nomura, Yoshimi Hasegawa, Ken-Ichi Yamamura, Hiroshi Kogo, Nobuhiko Sawai and Toshiyuki Matsuzaki
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Journal Title
PLoS One
Volume: 10
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Fatty acid-binding protein 7 regulates function of caveolae in astrocytes through expression of caveolin-1.2015
Author(s)
Yoshiteru Kagawa, Yuki Yasumoto, Kazem Sharifi, Majid Ebrahimi, Ariful Islam, Hirofumi Miyazaki, Yui Yamamoto, Tomoo Sawada, Hiroko Kishi, Sei Kobayashi, Motoko Maekawa, Takeo Yoshikawa, Eiichi Takaki, Akira Nakai, Hiroshi Kogo, Toyoshi Fujimoto and Yuji Owada
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Journal Title
Glia
Volume: 63
Pages: 780-794
DOI
Peer Reviewed
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