2014 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
24590269
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Research Institution | University of Tsukuba |
Principal Investigator |
村野 健作 筑波大学, 医学医療系, 助教 (80535295)
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Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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Keywords | ヒストンシャペロン |
Outline of Annual Research Achievements |
精子形成の過程で、精子核は遺伝情報を次世代へと伝えるために特化した高度に凝集したクロマチン構造をとる。一方、受精の過程で精子核DNAは膨潤し、転写複製に適したクロマチン構造をとる。本研究では精子形成および受精の過程における精子核クロマチンの凝集および膨潤機構を明らかにすることを目的としている。特にアデノウイルスの感染サイクルと精子形成・受精過程の生物学的類似性に着目し、精子核クロマチンの膨潤活性を持つヒストンシャペロンTAF-Iに着目して解析を進めてきた。 TAF-Iへテロマウスの卵と精子を用いて試験管内受精を行い、受精過程における精子クロマチンの凝集および膨潤過程の観察を試みた。TAF-IKO胚は8.25日目から野生型に比べて徐々に成長が遅れてくるが、2細胞期4細胞期のような初期胚では表現形がみられなかった。そこで2細胞期、4細胞期での母性由来のTAF-Iの量を免疫染色により観察してみた結果、TAF-I KO受精卵において母性TAF-Iが4細胞期まで残存することが明らかとなった。受精卵の母性由来のTAF-Iの機能を阻害するためマウスTAF-Iに対する抗体を作製した。これまでに作製した抗体を未受精卵へインジェクションを試みてきた。しかしながらニードルによる抗体のインジェクションが卵に対してストレスが大きいため、現在までに母性TAF-Iの機能について評価検討できていない。今後は、卵特異的にTAF-I遺伝子を欠損するコンディショナルノックアウトマウスの作製が必要であると考えている。
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Research Products
(6 results)