ＴＲＰＭ２の新規活性化機構とその機能異常が導く細胞死の解明

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24590275
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 沼田 朋大 京都大学, 地球環境学堂, 助教 (20455223)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: ＴＲＰ / 細胞容積調節 / パッチクランプ / TRPM2 / CD38 / ＥＦＨＣ１ / てんかん / 国際情報交換

Outline of Annual Research Achievements

・上皮細胞におけるTRPM2の細胞容積調節と細胞死における役割の解明
細胞容積調節とその破綻が起こす細胞死にイオンチャネルは重要な役割を担っている[Okada et al. 2001 J Physiol.]。また過去の報告によりHICCの機能を阻害剤で抑制すると細胞増殖が抑制されアポトーシス死が促進されることが分かっている[Shimizu et al. 2006 Cell Physiol Biochem]。そこで、高浸透圧刺激を行った際のTRPM2の関与を検討するために阻害剤やsiRNAを用いてコールターカウンターにより細胞容積測定を行った。さらにその際にカスパーゼ活性やDNAラダーの確認など種々の細胞死検出法によりアポトーシス死、ネクローシス死を検討した。
・TRPM2発現細胞にEFHC1を共発現させた際の細胞死への関与の解明
前年度に作成した8種類のEFHC1の変異体とTRPM2を共発現した際の細胞死アッセイをTRPM2と細胞死について一般的に用いられている過酸化水素刺激[Hara et al. 2002 Mol Cell]で細胞死をトリパンブルー染色を行った。この際、過酸化水素刺激は濃度によって細胞死に変化があることが知られているため[Barros, L.F. et al 2003 Cell Death Differ.]、過酸化水素濃度依存性の検討を行った。
研究計画のまとめとして、てんかんに関わるTRPM2の新規活性化調節機構の結果は、Cell Calciumに報告し、上皮細胞におけるTRPM2の生理的な役割として、J Physiology(London)に報告した。

Research Products

• [Journal Article] Compromised maturation of GABAergic inhibition underlies abnormal network activity in the hippocampus of epileptic Ca2+ channel mutant mice, tottering. (2015)
  • Author(s): Nakao A, Miki T, Shimono K, Oka H, Numata T, Kiyonaka S, Matsushita K, Ogura H, Niidome T, Noebels JL, Wakamori M, Imoto K, Mori Y
  • Journal Title: Pflugers Arch Volume: 467 Pages: 737-752
  • DOI: 10.1007/s00424-014-1555-6
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Trans-nitrosylation Directs TRPA1 Selectivity in N-Nitrosamine Activators. (2014)
  • Author(s): Kozai D, Kabasawa Y, Ebert M, Kiyonaka S, Man F, Otani Y, Numata T, Takahashi N, Mori Y, Ohwada T.
  • Journal Title: Mol Pharmacol. Volume: 85 Pages: 175-185
  • DOI: dx.doi.org/10.1124/mol.113.088864.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Temperature sensitivity of acid-sensitive outwardly rectifying (ASOR) anion channels in cortical neurons is involved in hypothermic neuroprotection against acidotoxic necrosis. (2014)
  • Author(s): Sato-Numata K, Numata T, Okada Y
  • Journal Title: Channels (Austin) Volume: 8 Pages: 278-283
  • DOI: 10.4161/chan.27748
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Transient Receptor Potential Melastatin 2 Protects Mice against Polymicrobial Sepsis by Enhancing Bacterial Clearance. (2014)
  • Author(s): Qian X, Numata T, Zhang K, Li C, Hou J, Mori Y, Fang X
  • Journal Title: Anesthesiology Volume: 121 Pages: 336-351
  • DOI: 10.1097/ALN.0000000000000275.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] TRPM2の細菌クリアランス促進による敗血症に対する保護効果 (2015)
  • Author(s): 沼田 朋大、銭 小偉、井上 隆司、方 向明、森 泰生
  • Organizer: 日本生理学会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場・展示場（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [Presentation] 酸感受性外向整流性アニオンチャネル（ASOR）における温度感受性と新阻害剤の探究 (2015)
  • Author(s): 佐藤(沼田)かお理、沼田朋大、 岡田泰伸
  • Organizer: 日本生理学会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場・展示場（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2015-03-21 – 2015-03-21
• [Presentation] 神経細胞酸毒性死防御における酸感受性アニオンチャネル制御 (2014)
  • Author(s): 沼田 朋大
  • Organizer: 福岡薬理・生理系研究会
  • Place of Presentation: 福岡大学（福岡県福岡市）
  • Year and Date: 2014-12-09 – 2014-12-09
• [Presentation] 虚血・再灌流傷害因子TRPM2の心臓における役割 (2014)
  • Author(s): 沼田 朋大、清水 俊一、井上 隆司、森 泰生
  • Organizer: 日本循環薬理学会
  • Place of Presentation: 山形テルサ（山形県山形市）
  • Year and Date: 2014-12-05 – 2014-12-05
• [Presentation] TRPM2の細菌クリアランス促進による敗血症に対する保護作用 (2014)
  • Author(s): 沼田 朋大、XiaoWei Qian 、Yasuo Mori、XiangMing Fang
  • Organizer: 西日本生理学会
  • Place of Presentation: 琉球大学 研究者交流施設50周年記念館（沖縄県中頭郡）
  • Year and Date: 2014-10-23 – 2014-10-24
• [Presentation] 神経系の新規酸素受容体 (2014)
  • Author(s): 沼田 朋大、森 泰生
  • Organizer: 日本神経科学会学会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-12 – 2014-09-12
  • Invited
• [Remarks] 福岡大学医学部生理学講座
  • URL: http://www.med.fukuoka-u.ac.jp/physiol/