2012 Fiscal Year Research-status Report
胃腸管間質腫瘍における低酸素応答関連分子異常の臨床病理学的意義に関する研究
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24590413
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
山元 英崇 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30404073)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 胃腸管間質腫瘍 / 低酸素 |
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| Research Abstract |
胃腸管間質腫瘍(GIST)において、KITまたはPDGFRA遺伝子の機能獲得型変異に加え、HIF(hypoxia-induced factor)やその制御因子であるVHL(von-Hippel-Lindau), HIFの蓄積に影響を与えるTCA回路の構成因子であるSDH(succinate dehydrogenase), FH(fumarate hydratase)等の低酸素応答に関連する分子の異常を解析し、GISTの発生や高悪性化への関与を解明し、分子病態に応じたGISTの個別化治療の礎とすることを目的とした研究である。ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)標本より、DNAを抽出し、KIT, PDGFRAについて、PCR,シークエンス法にて遺伝子変異を検出し、これまでの報告と同様の遺伝子変異のパターンや頻度の結果を得た。また、HIF-1α, SDHBの免疫組織化学染色を行い、臨床病理学的因子との相関を検討している。さらに新鮮凍結切片を用い、microRNA arrayを行い、GISTの悪性度と相関して、有意に発現増加あるいは低下しているmicroRNAがリストアップされた。この結果と合わせ、低酸素応答分子との関連が報告されているマイクロRNA(miRNA)につき定量的RT-PCRを行ったところ、腫瘍サイズや組織学的悪性度と相関を認めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初計画のKIT, PDGFRA遺伝子変異解析については、これまでの報告例とほぼ同様の結果が得られ、ほぼ計画通りに進行した。SDHやVHLの遺伝子変異ならびにメチル化解析については、終了していないが、SDH, HIFの免疫組織化学染色やmicro RNAのRT-PCRは当初予定より早く開始できた。よって概ね順調に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
前年度に引き続き、SDHやVHLの遺伝子変異ならびにメチル化解析を行う。またHIFと制御分子(SDH, FH, VHL, リン酸化mTOR)の蛋白発現を免疫組織化学染色およびWestern blottingにて引き続き解析する。HIF標的遺伝子(VEGF, GLUT-1, CAIX)については、蛋白発現（免疫組織化学染色）およびmRNA発現レベル（定量的RT-PCR）を解析する。以上の解析結果とKIT/PDGFRA遺伝子変異パターンを総合して、HIF関連分子の異常、標的遺伝子の発現レベルと臨床病理学的因子、病理組織学的特徴ならびに予後との相関を統計学的に解析する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
免疫組織化学染色やウエスタンブロットの抗体ならびに染色関連試薬、PCR（シークエンスや定量的PCR)関連試薬の購入が主な研究費の用途である。また国内学会で当該年度までの研究成果を発表予定であり、その旅費に使用する予定である。
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