2013 Fiscal Year Research-status Report
肺癌の浸潤・転移に膜型セリンプロテアーゼインヒビターはどのように関与しているか？
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24590419
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
田中 弘之 宮崎大学, 医学部, 助教 (90433060)
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| Keywords | 肺癌 / 膜蛋白質 / HAI-1 / HGF / LRP11 |
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| Research Abstract |
肺癌における浸潤・転移機構と肝細胞増殖因子Hepatocyte Growth Factor (HGF)系およびその制御の要であるHGF activator inhibitor type-1 (HAI-1)およびHAI-1類似蛋白であるLow density lipoprotein receptor-related protein 11 (LRP11)がどのように関わっているかを明らかにすることは、肺癌の分子学的病態の一側面を解明することにつながり、また新規分子標的治療薬の標的にもなりうる可能性がある。
われわれが行ったノーザンブロットを用いた予備実験では、ヒト正常臓器において脳・前立腺および精巣にLRP11の遺伝子発現がみられ、肺ではその遺伝子発現が軽度認められた。LRP11に関する文献的報告は全くない。このためCHO細胞にヒトLRP11を過剰発現させたC
HO-hLRP11細胞を作成し、RT-PCR法でLRP11の遺伝子発現を確認した。LRP11遺伝子発現を確認したCHO-hLRP11細胞株から蛋白抽出（Cellytic溶液を用いて蛋白抽出）を行い、western blotでLRP11の蛋白発現を市販のポリクローナル抗体を用いて確認した。
ヒト肺癌組織を用いた免疫染色では、腺癌、扁平上皮癌、小細胞癌において、癌細胞膜および細胞質に陽性像が得られた。ヒト肺癌組織を用いた免疫染色では、HAI-1およびLRP11の発現と予後を解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
LRP11の蛋白発現を市販のポリクローナル抗体を用いて確認した。CHO-hLRP11細胞株および各種肺癌培養細胞株を用いたwestern blotでは、予測される部位ではなく、より大きなサイズの部位にバンドがみられ、二量体が形成されている可能性がある。western blotの抗体メーカーと自実験の結果の相違を検索中である。
また耐震工事による研究室の引越のため、研究の中断を余儀なくされた。
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| Strategy for Future Research Activity |
膜蛋白質であるHAI-1およびLRP11について、FFPEによる切片で免疫染色を施行し、その臨床病理学的解析を行う予定である。
またHAI-1およびLRP11の肺癌における機能解析およびin vitroにおけるシグナル伝達を含めたpathwayの解析やエピジェネティクスな機構について解析を行っていく予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
実験室の耐震工事による引越のため、実験が一時中断せざるを得なかったため。
耐震工事中に行う予定であった実験を行う際の消耗品および抗体など免疫染色に関する実験に使用する予定である。
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