2012 Fiscal Year Research-status Report
神経内分泌肺癌における神経内分泌分化形質獲得メカニズムの全容解明と治療への応用
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24590428
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kyorin University |
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Principal Investigator |
矢澤 卓也 杏林大学, 医学部, 准教授 (50251054)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤原 正親 杏林大学, 医学部, 講師 (20407026)
佐藤 華子 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (60438132)
原 由紀子 杏林大学, 医学部, 講師 (40313267)
下山田 博明 杏林大学, 医学部, 助教 (60381472)
菅間 博 杏林大学, 医学部, 教授 (10195191)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 人体病理学 / 肺癌 / 神経内分泌癌 / 分化形質 / 分子病理学 |
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| Research Abstract |
種々の組織型(小細胞癌、扁平上皮癌、腺癌、大細胞癌)に由来する肺癌培養細胞を用い、非小細胞癌株に比して小細胞癌株において有意に発現の高いホメオボックス遺伝子の同定を試みた。その結果、LHX2, LHX6, FOXA1, FOXA2, BRN2が小細胞癌において高発現していることが判明した。これらのホメオボックス型転写因子に対する発現ベクターを構築しそれぞれを単独で非小細胞癌株に遺伝子導入したところ、LHX2, LHX6, FOXA1, FOXA2については神経内分泌マーカー(neural cell adhesion molecle-1, synaptophysin, chromogranin A)の変動は確認されなかったが、BRN2についてはいずれの神経内分泌マーカーの発現も亢進させることが明らかになった。さらにBRN2 (POU3F2)に加えてPOU3F1, POU3F3, POU4F1, POU4F2, POU4F3の発現状態についても検索を進めた。その結果、これらのPOUホメオボックス因子は小細胞癌株特異的に発現していることが判明した。
肺癌組織(小細胞癌、扁平上皮癌、腺癌)におけるBRN2の発現状態について、免疫組織化学的解析を行った。その結果、BRN2の発現は小細胞癌に高頻度に認められた。今後非神経内分泌肺癌細胞から神経内分泌肺癌細胞へと形質転換を試みるにあたり、遺伝子導入を行う肺癌細胞にどのような背景形質が必要であるのかを探るため、肺癌組織を用いてcytokeratin 7 (CK7)の発現状態を検索してみた。その結果、肺小細胞癌は腺癌と同様にCK7を発現していること、扁平上皮癌にCK7の発現はみられないことが判明した。この結果より、今後は形質転換を試みる肺癌細胞株に腺癌株を加えていくこととした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
肺小細胞癌に特徴的なホメオボックス遺伝子発現状態の解析については、HOX群、FOX群、PAX群、LHX群、３型POU群、４型POU群と、多種の遺伝子についての解析を行うことができた。また有意に小細胞癌で発現の高かったものについては、約1/3の発現ベクター作成が完了した。更に免疫組織化学的解析を同時進行させることにより、小細胞癌細胞が有する神経内分泌形質以外の形質についても検索を進めることができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、今年度の検討で得られた知見を踏まえ、有意に小細胞癌で発現の高いホメオボックス遺伝子の発現ベクター作成を推進するとともに、それらの神経内分泌形質誘導能のスクリーニング、ASCL1等の神経内分泌細胞特異的basic helix-loop-helix型転写因子との共発現系を構築し、非神経内分泌肺癌細胞から神経内分泌肺癌細胞への形質転換を試みていきたいと考えている。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
上記研究を推進するにあたり、次年度の研究費は、分子生物学的試薬、器具の購入、遺伝子配列検索費、細胞培養に用いる試薬、器具の購入等に充当したいと考えている。
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Research Products
(6 results)
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[Journal Article] POU domain transcription factor BRN2 is crucial for expression of ASCL1, ND1 and neuroendocrine marker molecules and cell growth of small cell lung cancer2013
Author(s)
Ishii J, Sato H, Sakaeda M, Shishido-Hara Y, Hiramatsu C, Kamma H, Shimoyamada H, Fujiwara M, Endo T, Aoki I, Yazawa T
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Journal Title
Pathology International
Volume: 63
Pages: 158-168
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Neural lineage-specific homeoprotein BRN2 is directly involved in TTF1 expression in small-cell lung cancer2013
Author(s)
Sakaeda M, Sato H, Ishii J, Miyata C, Kamma H, Shishido-Hara Y, Shimoyamada H, Fujiwara M, Endo T, Tanaka R, Kondo H, Goya T, Aoki I, Yazawa T
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Journal Title
Laboratory Investigation
Volume: 93
Pages: 408-421
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Differences of molecular expression mechanisms among neural cell adhesion molecule 1, synaptophysin, and chromogranin A in lung cancer cells2012
Author(s)
Kashiwagi K, Ishii J, Sakaeda M, Arimasu Y, Shimoyamada H, Sato H, Miyata C, Kamma H, Aoki I, Yazawa T
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Journal Title
Pathology International
Volume: 62
Pages: 232-245
DOI
Peer Reviewed
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