次世代分子標的治療実現に向けたマルチキナーゼ阻害薬のリプロファイリング

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24590469
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 津田 真寿美 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30431307)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: キナーゼ阻害剤 / 腫瘍 / 分子標的治療薬

Outline of Annual Research Achievements

癌の発生・進展に関与する細胞内シグナル伝達の制御破綻は、主にキナーゼの活性亢進に起因するため、キナーゼを標的とした分子標的治療薬の開発・臨床応用が進んでいる。現在、gefitinib (EGFR阻害薬)やimatinib (BCR-ABL阻害薬)などキナーゼを標的とした分子標的治療薬が実臨床でも使用されているが、低い奏功率、副作用や耐性細胞の出現など、克服すべき問題も多い。本研究では、現在問題となっている分子標的治療薬に対する耐性メカニズムを解明し、耐性解除のために有効なキナーゼ阻害剤の選定とリプロファイリングを目的とする。具体的には、ヒト脳腫瘍細胞株を用いて各種キナーゼ阻害剤に対する耐性細胞株を樹立後、各細胞株で活性化亢進しているキナーゼおよびその下流シグナル伝達経路を同定、薬剤耐性を解除するために最も効率の良いキナーゼ阻害剤を洗い出す。当該年度は、下記①～③を行った。
①分子標的治療薬耐性獲得メカニズムの解明：樹立した３種類の分子標的治療薬耐性ヒト悪性グリオーマ細胞を用いて、薬剤耐性との関連性が報告されているstemnessマーカーに対するPCRアレイを施行し、stemness・アポトーシス制御・薬剤排出機構に関与する分子群を同定した。
②キナーゼ阻害薬の有効性検証：上記①で同定された分子および関連シグナル経路において、重要と想定されるキナーゼのsiRNAおよび特異的阻害剤を樹立した各分子標的治療薬耐性グリオーマ細胞に処理し、耐性解除に有用であるかを検討した。
③キナーゼ阻害薬の交叉検証：上記②で耐性解除に有用であったキナーゼ阻害剤において、その標的分子をイムノブロッティングならびにリン酸化アレイによって検討した。本来の標的分子以外に抑制効果が認められたキナーゼ阻害薬に関しては、キナーゼのATP結合部位の構造類似性に基づく交叉の可能性を検証した。

Research Products

• [Journal Article] CRK adaptor protein induces epithelial-mesenchymal transition and metastasis of bladder cancer cells via HGF/c-Met feedback loop. (2015)
  • Author(s): Matsumoto R, Tsuda M, Wang L, Maishi N, Abe t, Kimura T, Tanino M, Nishihara H, Hida K, Ohba Y, Shinohara N, Nonomura K, Tanaka S.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: in press Pages: in press
  • DOI: doi: 10.1111/cas.12662.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Sustained elevation of Snail promotes glial-mesenchymal transition after irradiation in malignant glioma. (2014)
  • Author(s): Mahabir, R., Tanino, M., Elmansuri, A., Wang, L., Kimura, T., Itoh, T., Ohba, Y., Nishihara, H., Shirato, H., Tsuda, M., Tanaka, S.
  • Journal Title: Neuro Oncol. Volume: 5 Pages: 671-685
  • DOI: doi: 10.1093/neuonc/not239.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epiregulin enhances tumorigenicity by activating the ERK/MAPK pathway in glioblastoma. (2014)
  • Author(s): Kohsaka, S., Hinohara, K., Wang, L., Nishimura, T., Urushido, M., Yachi, K., Tsuda, M., Tanino, M., Kimura, T., Nishihara, H., Gotoh, N., Tanaka, S.
  • Journal Title: Neuro Oncol. Volume: 16 Pages: 960-970
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] C-ERC/mesothelin provokes lymphatic invasion of colorectal adenocarcinoma. (2014)
  • Author(s): Kawamata, F., Homma, S., Kamachi, H., Einama, T., shirai, Y., Tsuda, M., Tanaka, S., Maeda, M., Kajino, K., Hino, O., Takhashi, N., Kamiyama, T., Nishihara, H., Taketomi, A, and Todo, S.
  • Journal Title: J Gastroenterol. Volume: 49 Pages: 81-92
  • DOI: doi: 10.1007/s00535-013-0773-6.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] SS18-SSX-regulated miR-17 promotes tumor growth of synovial sarcoma by inhibiting p21WAF1/CIP1. (2014)
  • Author(s): Minami, Y., Kohsaka, S., Tsuda, M., Yachi, K., Hatori, N., Tanino, M., Kimura, T., Nishihara, H., Minami, A., Iwasaki, N., Tanaka, S.
  • Journal Title: Cancer Sci. Volume: 105 Pages: 1152-1159
  • DOI: doi:10.1111/cas.12479.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Differential diagnosis of small cell glioblastoma and anaplastic oligodendroglioma: a case report of an elderly man. (2014)
  • Author(s): Takahashi, K., Tsuda, M., Kanno, H., Murata, J., Mahabir, R., Ishida, Y., Kimura, T., Tanino, M., Nishihara, H., Nagashima, K., and Tanaka, S.
  • Journal Title: Brain Tumor Pathol. Volume: 31 Pages: 118-23
  • DOI: doi: 10.1007/s10014-013-0158-9.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Mir-326 promotes tumor growth of human synovial sarcoma. (2015)
  • Author(s): Yusuke Minami, Masumi Tsuda, Shinji Kohsaka, Akio Minami, Shinya Tanaka, Norimasa Iwasaki
  • Organizer: 2015 Annual Meeting, Orthopaedic Research Society
  • Place of Presentation: Las Vegas, USA
  • Year and Date: 2015-03-28 – 2015-03-31
• [Presentation] High aldo-keto reductase 1C1 expression in metastatic bladder cancer cells associated with invasive potential and drug resistance. (2015)
  • Author(s): Ryuji Matsumoto, Masumi Tsuda, Nobuo Shinohara, Takashige Abe, Shinya Tanaka, Katsuya Nonomura.
  • Organizer: 30th Anniversary EAU Congress
  • Place of Presentation: Madrid, Spain
  • Year and Date: 2015-03-20 – 2015-03-24
• [Presentation] Signaling adaptor protein CRK promotes epithelial-mesenchymal transition and metastasis of bladder cancer cells via HGF-Met signaling. (2015)
  • Author(s): Ryuji Matsumoto, Masumi Tsuda, Nobuo Shinohara, Takashige Abe, Shinya Tanaka, Katsuya Nonomura.
  • Organizer: 30th Anniversary EAU Congress
  • Place of Presentation: Madrid, Spain
  • Year and Date: 2015-03-20 – 2015-03-24
• [Presentation] 27歳で発症し、11年の経過観察後に摘出された頚髄腫瘍の1例 (2015)
  • Author(s): 湯澤明夏、西原広史、岡田佳奈子、津田真寿美、田中伸哉
  • Organizer: 第114回東京脳腫瘍研究会
  • Place of Presentation: 東京医科大学（東京都）
  • Year and Date: 2015-01-17
• [Presentation] High Aldo-Keto Reductase 1C1 Expression in Metastatic Bladder Cancer Cells Associated with Invasive Potential and Drug Resistance. (2014)
  • Author(s): 松本隆児、津田真寿美、篠原信雄、安部崇重、田中伸哉、野々村克也
  • Organizer: 第66回西日本泌尿器科学会
  • Place of Presentation: 倉敷市芸文館・倉敷アイビースクエア（岡山県・倉敷市）
  • Year and Date: 2014-11-06 – 2014-11-08
• [Presentation] Preclinical evaluation of EZH2 inhibitors in models of human synovial sarcoma. (2014)
  • Author(s): Heike Keilhack, Satoshi Kawano, Sarah K. Knutson, Natalie M. Warholic, Jamie Kubica, Galina Kuznetsov, Shanqin Xu, Yonghong Xiao, Roy M. Pollock, Jesse S. Smith, Kevin K. Kuntz, Yukinori Minoshima, Masumi Tsuda, Shinya Tanaka, Robert A. Copeland
  • Organizer: Connective Tissue Oncology Society, 2014 Annual Meeting
  • Place of Presentation: InterContinental Berlin Hotel, Berlin, Germany
  • Year and Date: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [Presentation] ヒト滑膜肉腫におけるmiR-326の機能解析 (2014)
  • Author(s): 三浪友輔、津田真寿美、高阪真路、田中伸哉、岩崎倫政
  • Organizer: 第29回日本整形外科学会基礎学術集会
  • Place of Presentation: 城山観光ホテル（鹿児島県・鹿児島市）
  • Year and Date: 2014-10-09 – 2014-10-10
• [Presentation] IGFBP2 in acquired drug resistance to TKIs targeting EGFR, c-Met, and PDGFR in glioblastoma (2014)
  • Author(s): Masumi Tsuda, Lei Wang, Mishie Tanino, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara, Shinya Tanaka
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜 (神奈川県・横浜市)
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] Resistance to tyrosine kinase inhibitors: Transition from mesenchymal to stemness-like features in glioblastoma. (2014)
  • Author(s): Shinya Tanaka, Masumi Tsuda, Lei Wang, Michie Tanino, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜 (神奈川県・横浜市)
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] MicroRNA miR-326 promotes tumor growth of human synovial sarcoma. (2014)
  • Author(s): Yusuke Minami, Masumi Tsuda, Shinji Kohsaka, Shinya Tanaka, Norimasa Iwasaki
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜 (神奈川県・横浜市)
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] EpiregulinはERK/MAPK pathwayを介して膠芽腫の腫瘍形成性を促進する (2014)
  • Author(s): 王磊、高坂真路、日野原邦彦、漆戸万沙那、谷内一博、津田真寿美、谷野美智枝、木村太一、西原広史、後藤典子、田中伸哉
  • Organizer: 第110回北海道癌談話会例会
  • Place of Presentation: 札幌医科大学（北海道・札幌市）
  • Year and Date: 2014-09-13
• [Presentation] EMT-stemnesss transition and functional properties of IGFBP2 in acquired drug resistance to TKIs targeting EGFR, c-Met, and PDGFR in glioblastoma. (2014)
  • Author(s): Masumi Tsuda, Lei Wang, Mishie Tanino, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara, Shinya Tanaka
  • Organizer: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting, Mechanisms and Model of Cancer,
  • Place of Presentation: New York, USA
  • Year and Date: 2014-08-12 – 2014-08-16
• [Presentation] Crk adaptor protein induces EMT and metastasis via novel Rac1/Snail and RhoA/Slug signaling along with TGF-β1 positive feedback loop in lung cancer cell A549. (2014)
  • Author(s): Aiman Elmansuri, Mishie Tanino, Roshan Mahabir, Lei Wang, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara, Yasuhiro Hida, Hirotoshi Akita, Masumi Tsuda, Shinya Tanaka
  • Organizer: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting, Mechanisms and Model of Cancer
  • Place of Presentation: New York, USA
  • Year and Date: 2014-08-12 – 2014-08-16
• [Presentation] グリオーマモデル細胞を用いる不死化・癌化に伴う糖鎖発現変動の解析 (2014)
  • Author(s): 古川潤一、津田真寿美、岡田和恵、木村太一、朴錦花、田中伸哉、篠原康郎
  • Organizer: 第33回日本糖質学会年会
  • Place of Presentation: 名古屋大学豊田講堂（愛知県・名古屋市）
  • Year and Date: 2014-08-10 – 2014-08-12
• [Presentation] ヒト滑膜肉腫におけるmiR-326の機能解析 (2014)
  • Author(s): 三浪友輔、津田真寿美、高阪真路、田中伸哉、岩崎倫政
  • Organizer: 第47回日本整形外科学会骨軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪府・大阪市）
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-18
• [Presentation] 診断と治療に苦慮し、急速な進行をたどったepithelioid gliosarcomaの症例 (2014)
  • Author(s): 岡本沙織、小森隆司、新田雅之、丸山隆志、村垣善浩、津田真寿美、田中伸哉、岡田芳和
  • Organizer: 第55回日本神経病理学会総会
  • Place of Presentation: 学術総合センター（東京都）
  • Year and Date: 2014-06-05 – 2014-06-07
• [Presentation] 悪性神経膠腫放射線照射後のSnailによるGlial-mesenchymal transition (GMT)の関与 (2014)
  • Author(s): 谷野美智枝、Roshan Mahabir、 Aiman Elimansuri、 王磊、木村太一、西原広史、伊東民雄、白土博樹、津田真寿美、田中伸哉
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島県・徳島市）
  • Year and Date: 2014-05-23 – 2014-05-24
• [Presentation] EGFR、c-Met、PDGFR阻害薬耐性膠芽腫細胞株における多能性獲得とIGFBP2の機能解析 (2014)
  • Author(s): 津田真寿美、王磊、谷野美智枝、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島県・徳島市）
  • Year and Date: 2014-05-23 – 2014-05-24
• [Presentation] 免疫染色を用いたヒートマップ解析による膠芽腫の分子発現プロファイリング (2014)
  • Author(s): 西原広史、宮崎将也、木村太一、谷野美智枝、津田真寿美、田中伸哉
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島県・徳島市）
  • Year and Date: 2014-05-23 – 2014-05-24
• [Presentation] Pilomyxoid-spectrum astrocytoma２例の臨床病理学的検討-BRAF遺伝子異常の検討も加えて- (2014)
  • Author(s): 伊東民雄、佐藤憲市、及川光照、尾崎義丸、中村博彦、津田真寿美、田中伸哉、杉尾啓徳、浅野目卓、長嶋和郎
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島県・徳島市）
  • Year and Date: 2014-05-23 – 2014-05-24
• [Remarks] 北海道大学大学院医学研究科 腫瘍病理学分野
  • URL: http://patho2.med.hokudai.ac.jp/
• [Patent(Industrial Property Rights)] ホルマリン固定生体組織内での活性型低分子量GTP結合蛋白質検出方法 (2015)
  • Inventor(s): 田中伸哉、津田真寿美、谷野美智枝
  • Industrial Property Rights Holder: 田中伸哉、津田真寿美、谷野美智枝
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Industrial Property Number: 特願：2015-043171
  • Filing Date: 2015-03-05
• [Patent(Industrial Property Rights)] グリオーマの診断マーカー、診断方法、糖鎖マーカーを検出する方法及び糖鎖マーカー (2014)
  • Inventor(s): 篠原康郎、田中伸哉、古川潤一、津田真寿美
  • Industrial Property Rights Holder: 篠原康郎、田中伸哉、古川潤一、津田真寿美
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Industrial Property Number: 特願：2014-163222
  • Filing Date: 2014-08-08