2014 Fiscal Year Annual Research Report
末梢血エクソゾーム内マイクロＲＮＡを用いた消化器癌バイオマーカーの確立と機能解析
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24590944
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
馬場 英司 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00315475)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新納 宏昭 九州大学, 大学病院, 准教授 (20380636)
赤司 浩一 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80380385)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 消化器癌 / 癌幹細胞 / エクソゾーム / 微小環境 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではH24年度より消化器癌細胞由来エクソゾームの生体内機能を明らかにするため、(1) 消化器癌細胞由来のエクソゾームが特異的に含んでいるマイクロRNA（あるいは他の核酸）を同定すること、(2) この疾患特異的なマイクロRNAが機能を発揮する場として、消化器癌組織の中にある癌幹細胞とこれを取り巻く微小環境（ニッチ）との相互作用におけるエクソゾームの役割を明らかにすることに取り組んできた。(1)について、消化器癌患者および健常人の末梢血よりエクソゾームを調整し、マイクロRNAアレイによる比較により、疾患特異的なマイクロRNA候補を既に複数選別している。この研究では、末梢血中に多量に存在する正常細胞由来のエクソゾームと、癌細胞由来エクソゾームの選別が常に問題となる。そのため癌細胞由来エクソゾームを特異的に検出するために上皮系細胞特異的分子を標的とした新たなELISA法を開発し、患者末梢血での測定を開始した。(2)については、消化器癌手術検体より消化器癌幹細胞とニッチを形成する細胞を個別に調整・評価し、機能解析をすることが必要である。分離した細胞を既報の幹細胞マーカー分子を指標にFACSにてソーティングを行い、この幹細胞性は免疫不全マウスにおける継続的な造腫瘍能、in vitroにおけるスフェア形成能にて確認を行った。また同様の手法で癌性腹水からの癌幹細胞についても解析した。このような臨床検体から分離された癌幹細胞を、特にin vitroにおいて安定して継代培養することにより、エクソゾーム等を介するニッチと癌幹細胞との関連の解析が可能となった。その結果、エクソゾームや種々の可溶性因子を含む癌性腹水などによる刺激により、癌幹細胞の上皮間葉転換（EMT）がコントロールされ、さらに癌幹細胞から分化した後の癌細胞が、これらの刺激により癌幹細胞の性質を再度獲得することも見いだした。
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