2014 Fiscal Year Annual Research Report
Ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｒａｔを用いた慢性膵炎発症の分子機構の研究
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24591010
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
石黒 洋 名古屋大学, 総合保健体育科学センター, 教授 (90303651)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古家 園子 生理学研究所, 個別研究 村上正隆, 特別協力研究員 (20096952)
長尾 静子 藤田保健衛生大学, 疾患モデル教育研究センター, 教授 (20183527)
中莖 みゆき 名古屋大学, 総合保健体育科学センター, 非常勤研究員 (30578729)
山本 明子 名古屋大学, 総合保健体育科学センター, 准教授 (60402385)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 膵導管細胞 / primary cilia |
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| Outline of Annual Research Achievements |
膵管を含めた管腔組織には、apical membraneより管腔内へ突出するprimary ciliaが存在する。本研究は、primary ciliaの機能が障害されている多発性嚢胞腎症のモデル動物であるPolycystic kidney（PCK）ラットの膵臓の機能と形態を解析する。
primary ciliaの超微形態を解析するために、PCKラットの膵臓から単離した小葉間膵管の管腔をN-acetylcysteineを含む溶液で灌流して粘液層と取り除き、glutaraldehyde液に浸して固定した後、管腔を縦方向に切り開く。オスミウム染色し、凍結乾燥したサンプルを走査電子顕微鏡で観察した。管腔を観察すると、敷石状に並んだ膵導管細胞の1つ1つに、細胞のほぼ中心から管腔内に突出する長さ5ミクロン程度のprimary ciliaを観察することができた。固定前の灌流方向、管腔内のATPおよび圧変化による細胞内カルシウム反応と、primary ciliaの走行と形態（長さ、太さ）との関係を解析中である。
Fura-2を用いて、細胞内カルシウム濃度の変化を解析した。管腔内圧を変化させた時の細胞内カルシウム反応は、PCKラットから単離した膵管の方が反応が大きかった。また、管腔内灌流液のカルシウムを除くと、PCKラットから単離した膵管では、自然発生的に細胞内カルシウム振動が観察されたが、正常ラットからの単離膵管では見られなかった。
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