Ｉｎ ｖｉｖｏの膵星細胞を標的とした慢性膵炎の治療戦略の開発

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24591016
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 大村谷 昌樹 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (60398229)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 膵星細胞 / 慢性膵炎

Outline of Annual Research Achievements

本研究課題では、①活性化した膵星細胞に特異的に薬剤を取り込ませるシステムの開発、②治療効果を評価するための慢性膵炎（膵線維症）モデル動物の開発、を行った。まず、モデルマウスの開発はヒト膵分泌性トリプシンインヒビターSPINK1 (マウスホモログはSpink3)を改変することで、3系統の慢性膵炎モデルマウスを作出することができた。1つめはヒトSPINK1遺伝子をX染色体に置換して、雌ではX染色体不活性化によって、モザイク状に発現させ、正常腺房細胞と死細胞が膵臓内において混在するモデルである。8週齢で線維化と腺房細胞の脱落が見られた。2番目は野生型SPINK1遺伝子をSpink3 locusに置換して、ノックインマウスを樹立し、片方のアリルの発現を抑制すると4週齢で同様に慢性膵炎モデルとなった。3番目はヒト遺伝子膵炎で見られるSPINK1の変異体をマウスに置換して、遺伝性膵炎と同じような表現型のモデルの作出にも成功した。後者になるほど、ヒトの病態を良く反映していると考えられた。すべてのモデルにおいて、膵星細胞の活性化が顕著に見られ（aSMAのウエスタンで確認）、活性型星細胞がビタミンAを取り込みやすい性質を利用し、ビタミンA表出リポソーム（ローダミン含有）を作製し、このマウスに投与したが、星細胞への取り込みは僅かにしか見られなかった。肝星細胞でのビタミンAの取り込みに比較し、膵星細胞では、その活性が低いため、と考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Production of knockout mice by DNA microinjection of various CRISPR/Cas9 vectors into freeze-thawed fertilized oocytes. (2015)
  • Author(s): Nakagawa, Y., Sakuma, T., Sakamoto, T., Ohmuraya, M., Nakagata, N. and Yamamoto, T.
  • Journal Title: BMC Biotechnol. Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] SPINK1 Status in Colorectal Cancer, Impact on Proliferation, and Role in Colitis-associated Cancer. (2015)
  • Author(s): Ida, S., Ozaki, N., Hirashima, K., Zaitsu, Y., Taki, K., Sakamoto, Y., Miyamoto, Y., Oki, E., Morita, M., Watanabe, M., Maehara, Y., Yamamura, K., Baba, H. and Ohmuraya, M.
  • Journal Title: Mol Cancer Res. Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Staging laparoscopy leads to rapid induction of chemotherapy for unresectable pancreatobiliary cancers. (2015)
  • Author(s): Hashimoto, D., Chikamoto, A., Sakata, K., Nakagawa, S., Hayashi, H., Ohmuraya, M., Hirota, M., Yoshida, N., Beppu, T. and Baba, H.
  • Journal Title: Asian journal of endoscopic surgery. Volume: 8 Pages: 59-62
  • DOI: doi: 10.1111/ases.12138.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical features and management of pancreatic solid pseudopapillary tumor. (2014)
  • Author(s): Tsukamoto, M., Hashimoto, D., Chikamoto, A., Abe, S., Ohmuraya, M. and Baba, H.
  • Journal Title: Am Surg. Volume: 80 Pages: 1212-1215
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation and analysis of serine protease inhibitor Kazal type 3-Cre driver mice. (2014)
  • Author(s): Sakata, K., Ohmuraya, M., Araki, K., Suzuki, C., Ida, S., Hashimoto, D., Wang, J., Uchiyama, Y., Baba, H. and Yamamura, K.
  • Journal Title: Exp Anim. Volume: 63 Pages: 45-53
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Autophagy regulation in pancreatic acinar cells is independent of epidermal growth factor receptor signaling. (2014)
  • Author(s): Ozaki, N., Fukuchi, Y., Tomiyoshi, SR., Uehara, H., Ida, S., Wang, J., Araki, K., Sibilia, M., Baba, H., Yamamura, K. and Ohmuraya, M.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. Volume: 446 Pages: 224-230
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2014.02.111.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Application of Oocyte Cryopreservation Technology in TALEN-Mediated Mouse Genome Editing. (2014)
  • Author(s): Nakagawa, Y., Sakuma, T., Nakagata, N., Yamasaki, S., Takeda, N., Ohmuraya, M. and Yamamoto, T.
  • Journal Title: Exp Anim. Volume: 63 Pages: 349-355
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pancreatic cancer in the remnant pancreas following primary pancreatic resection. (2014)
  • Author(s): Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Sakata, K., Miyake, K., Kuroki, H., Watanabe, M., Beppu, T., Hirota, M. and Baba, H.
  • Journal Title: Surg Today. Volume: 44 Pages: 1313-1320
  • DOI: doi: 10.1007/s00595-013-0708-0.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pancreaticodigestive anastomosis and the postoperative management strategies to prevent postoperative pancreatic fistula formation after pancreaticoduodenectomy. (2014)
  • Author(s): Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Hirota, M. and Baba, H.
  • Journal Title: Surg Today. Volume: 44 Pages: 1207-1213
  • DOI: doi: 10.1007/s00595-013-0662-x.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Impact of Postoperative Weight Loss on Survival After Resection for Pancreatic Cancer. (2014)
  • Author(s): Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Abe, S., Nakagawa, S., Beppu, T., Takamori, H., Hirota, M. and Baba, H.
  • Journal Title: JPEN J Parenter Enteral Nutr. Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed
• [Presentation] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • Author(s): 大村谷昌樹,坂田和也,高城克暢,松元美由紀,荒木喜美,山村研一
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜、横浜市、神奈川県
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] SPINK insufficiency causes impaired autophagy resulting in chronic pancreatitis. (2014)
  • Author(s): Ohmuraya, M., Sakata, K., Mareninova, O., Notohara, K., Gukovsky, I., Gukovskaya, A.
  • Organizer: 2014 APA/JPS 45th Anniversary Meeting
  • Place of Presentation: Hapuna Beach Prince Hotel、ハワイ島、ハワイ、米国
  • Year and Date: 2014-11-05 – 2014-11-08
• [Presentation] SPINK不全に伴うオートファジーの異常と慢性膵炎の発症 (2014)
  • Author(s): 大村谷昌樹
  • Organizer: 第22回若手膵臓研究会
  • Place of Presentation: 生田神社会館、神戸市、兵庫県
  • Year and Date: 2014-10-22 – 2014-10-22
• [Presentation] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • Author(s): 大村谷昌樹
  • Organizer: 第23回日本Cell Death学会学術集会
  • Place of Presentation: 東京医科歯科大学、東京都
  • Year and Date: 2014-07-18 – 2014-07-19
• [Presentation] 急性膵炎におけるオートファジー選択的基質p62の役割 (2014)
  • Author(s): 大村谷昌樹,能登原憲司,廣田昌彦
  • Organizer: 第45回日本膵臓学会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場、北九州市、福岡
  • Year and Date: 2014-07-11 – 2014-07-12