大動脈狭窄症の発症と進展におけるミッドカインの役割

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24591045
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 林 秀晴 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50135258)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐藤 洋 浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (30293632) ; 早乙女 雅夫 浜松医科大学, 医学部附属病院, 助教 (70509512) ; 加藤 秀樹 浜松医科大学, 医学部, 助教 (80314029)
• Keywords: 大動脈狭窄症 / ミッドカイン

Research Abstract

前年度までの研究で、大動脈弁狭窄症の手術検体から組織標本を作製し、HE染色、midkine免疫染色により、弁間質細胞（valve interstitial cell: VIC）内にmidkineが存在することを確認した。
本年度はコントロールとして剖検症例の大動脈弁を用い組織標本を作製し、Hえ染色およびmidkineの免疫染色を施行したところ、剖検症例でもmidkineに染色される症例が多く確認された。このため大動脈弁狭窄症との関連について更なる検討が必要と考えられた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

上記のように、大動脈弁疾患を有さない剖検例でもmidkineが検出された。剖検例の多くは癌や肺炎などの重傷感染症症例であり、midkineは種々の悪性腫瘍や感染症で発言が著しく更新することがしられている。そのため弁膜症以外の病態が関与している可能性が考えられた。
また、midkineはヘパリン投与時には血液細胞に発現することが明らかとなり、大動脈弁の手術時には大量のヘパリンを投与することから、特に弁検体の表層部では血球由来のmidkineのcontaminationが疑われた。
上記の問題を解決するため、手術検体においてmidkineのmRNAレベルでの発現について検討することとした。

Strategy for Future Research Activity

手術検体からｍRNAを抽出する際に、弁組織内の弁間質細胞（valve interstitial cell: VIC）密度が少ないため、種々のｍRNA抽出法を検討し、弁組織からのVIC由来のｍRNA採取の効率化の種々の方法で検討中である。
また、 VICの培養細胞を用いてin vitroの実験系でVICをカルシウム活性化溶液を用いて培養し、midkineの添加によりVICから繊維芽細胞や骨芽細胞への転換が促進されるかについて検討する予定である。