2012 Fiscal Year Research-status Report
認知症疾患のシナプスを標的とした病態解明と治療法の開発
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24591246
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
瓦林 毅 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (90186156)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | シナプス / アルツハイマー病 / レビー小体型認知症 / リピドラフト / 信号伝達 / オリゴマー / シヌクレイン / NMDA受容体 |
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| Research Abstract |
１．アルツハイマー病モデルマウスTg2576，タウオパチーモデルマウスTgTauP301L，レビー小体型認知症モデルマウスTgαSYNの脳からシナプス分画，後シナプス分画およびlipid rafts分画の抽出を行い，これらの分画に含まれる物質の同定をwestern blottingにて行った．それぞれのマウスで発現させたアミロイドbeta蛋白(Abeta)，タウおよびα-synucleinがシナプス分画などに経時的に蓄積していた．さらにシナプス毒性が最も強いと考えられる Abeta oligomerがシナプス分画に経時的に蓄積することを示した．
これらの神経変性疾患モデルマウスと対照のwild typeマウスにて信号伝達系の比較検討を行うと，グルタミン酸伝達系およびインスリン伝達系などの関連蛋白の異常が認められた．fynの増加，タウリン酸化酵素の蓄積と共にタウおよびα-synucleinのリン酸化が促進されることを見いだした．
２．モリス水迷路試験を行い，Tg2576マウスの行動実験の出現時期を同定した．
３．アルツハイマー病，レビー小体型認知症患者脳のパラフィン切片で免疫染色を行い，Abetaやリン酸化α-synucleinの蓄積と共にdrebrinなどの後シナプス蛋白が減少することを認めた．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
1.各モデルマウスの飼育
アルツハイマー病モデルマウスTg2576，タウオパチーモデルマウスTgTauP301L，レビー小体型認知症モデルマウスTgαSYNのそれぞれについて飼育繁殖を行い，尾から抽出したDNAのPCRでgenotypingを行った．実験に必要な数を揃えつつある．
2.マウスの行動実験と脳の抽出，パラフィン切片作製
マウスの行動実験を行い，学習障害の開始時期の検討を開始した．マウス脳からシナプス分画を抽出した．月齢毎の解剖によってパラフィン切片を作製しつつある．
3.シナプス，シナプスlipid raftsの解析
シナプス分画のwestern blotによってシナプス関連蛋白の回収を確認した．発現蛋白およびAbeta oligomerのシナプス分画への蓄積を確認した．アルツハイマー病，レビー小体型認知症患者脳にてシナプス蛋白の免疫染色による解析を開始した．
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続きマウスの繁殖を行って実験に必要な数を得る．マウスの解剖を経時的に行い，脳抽出液，パラフィン切片，血液および脳脊髄液の経時的なデータベースを作製する．
マウス脳からのシナプス分画，後シナプス分画，lipid rafts分画の抽出を確認し，今後シナプス分画からさらにlipid raftsの抽出を行う．Tg2576マウス以外でのモリス水迷路試験から学習障害の出現時期を決定し，薬剤投与時期を決定する．
アルツハイマー病およびレビー小体型認知症患者の凍結脳からシナプス分画の抽出を行い，その変化をwestern blottingで検討する．
培養細胞系を用いてシナプスを標的とする薬剤の選択を行う．
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
該当なし
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[Journal Article] Sortilin is required for toxic action of Aβ oligomers (AβOs): Extracellular AβOs trigger apoptosis, and intraneuronal AβOs impair degradation pathways2012
Author(s)
Takamura A, Sato Y, Watabe D, Okamoto Y, Nakata T, Kawarabayashi T, Oddo S, Laferla FM, Shoji M, Matsubara E
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Journal Title
Life Sci
Volume: 91
Pages: 1177-1186
DOI
Peer Reviewed
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