骨髄増殖性腫瘍の新しい原因遺伝子Ｌｎｋの機能解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24591399
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 山之内 純 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (10423451)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 骨髄増殖性腫瘍 / 本態性血小板血症

Outline of Annual Research Achievements

骨髄増殖性腫瘍のうち、本態性血小板血症患者から血小板を分離し、血小板mRNAを抽出した。RT-PCR法でLnk mRNAを増幅し、シークエンス解析を行った。同時に、JAK2 V617F変異の有無について、allele specific PCR法と直接シークエンス法によって解析した。この遺伝子解析は愛媛大学ヒトゲノム・遺伝子解析研究倫理委員会の承認を得ている。その結果、本態性血小板血症患者28人のうちJAK2 V617F変異を21人に認めた。そこでJAK2変異陰性であった7人の患者でLnk遺伝子配列を調べたところ、1人にSH2ドメインにheterozygousな遺伝子異常を発見した。この変異はpolymorphismとしては報告されていない新たな変異であった。そこで、今回発見したLnkの遺伝子異常がJAK2 V617F変異と同じように恒常的にJAK/STAT系でリン酸化を起こし、シグナルが伝わっているかを確認することを計画し、今回発見した遺伝子異常のLnk変異体と、TPO依存性の細胞増殖を阻害すると報告されているLnk R392E、polymorphismとして報告されているLnk N537Dの３つの変異体を作成した。これらと野生型のLnkをBaF3細胞に遺伝子導入して、JAK/STAT系のシグナルについて検討した。さらにはマウスES細胞に遺伝子導入し、赤芽球系細胞または巨核球系細胞に分化させ、細胞分化についても検討した。

Research Products

• [Journal Article] 3.Abnormal behaviors and developmental disorder of hippocampus in zinc finger protein 521 (ZFP521) mutant mice. (2014)
  • Author(s): Ohkubo N, Matsubara E, Yamanouchi J, Akazawa R, Aoto M, Suzuki Y, Sakai I, Abe T, Kiyonari H, Matsuda S, Yasukawa M, Mitsuda N.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 9 Pages: e92848
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] Activation status of integrin aIIbb3 in essential thrombocythemia with calreticulin mutation (2014)
  • Author(s): Yamanouchi J, Hato T, Matsubara E, Azuma T, Nakanishi H, Fujiwara H, Yakushijin Y, Yasukawa M.
  • Organizer: 56th ASH Annual Meeting
  • Place of Presentation: San Francisco, CA, USA
  • Year and Date: 2014-12-08
• [Presentation] Activation status of integrin aIIbb3 in essential thrombocythemia with calreticulin mutation (2014)
  • Author(s): Yamanouchi J, Hato T, Nakanishi H, Asai H, Matsubara E, Tanimoto K, Azuma T, Fujiwara H, Yakushijin Y, Yasukawa M.
  • Organizer: 第76回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪市
  • Year and Date: 2014-10-31