シェーグレン症候群発症の分子免疫学的解析と制御

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24591439
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 住田 孝之 筑波大学, 医学医療系, 教授 (00183054)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 自己抗原 / 自己反応性T細胞 / 自己免疫性唾液腺炎 / ムスカリン作動性アセチルコリン受容体 / T細胞エピトープ / IFN-γ / IL-17 / RORγt

Outline of Annual Research Achievements

我々の先行研究より、M3RペプチドをM3Rノックアウトマウス(M3R-/-)に免疫し、その脾細胞をRag1ノックアウトマウス(Rag1-/-)に細胞を移入し、シェーグレン症候群（SS）類似の唾液腺炎を発症するマウスモデル(M3R誘導唾腺炎、M3R induced sialadeniti, MIS)を樹立した。更に、CD3+T細胞の移入実験により唾液腺炎が誘導されることから、MISにおける自己免疫性唾液腺炎の発症機構は、M3R反応性T細胞により引き起こされていることを明らかにした。
本研究では、MIS発症に関わるサイトカインの同定を試みた。方法は、M3R-/-xIFN-γ-/-およびM3R-/-xIL-17-/-マウスを作成し、M3Rペプチドを免疫した後にその脾細胞をRag1-/-マウスに細胞移入し、唾液腺炎の発症を検討した。その結果、M3R-/-xIFN-/-γ→Rag1-/-マウスおよびM3RxIL-17-/-→Rag1-/-マウスにおいて、それぞれ唾液腺炎の改善が認められた。以上より、MISの発症には、IFN-γおよびIL-17がともに発症に関わっていることが判明した。
次に、MISをモデルとしてM3Rのアナログペプチド（altered peptide ligand, APL）を用いた抗原特異的治療戦略の開発をめざした。その結果、N1-APL5（AA7N→T）、N1-APL6（AA7N→C）、N1-APL(AA7N→S)がIFN―γ産生を、1st-APL8(AA140A→M)がIL-17産生を有意に抑制することが判明した。更に、N1-APL7をMISに投与することにより、唾液腺炎スコアが有意に抑制され、唾液腺量が改善した。以上の結果から、MISにおいて、M3RのAPL投与により自己免疫性唾液腺炎が抗原特異的に制御することが可能であることが判明した。

Research Products

• [Journal Article] M3 muscarinic acetylcholine receptor reactive IL-17 producing T cells promotes development of Sjogren's syndrome like sialadenitis. (2015)
  • Author(s): Iizuka M, Tsuboi H, Asashima H, Hirota T, Kondo Y, Matsui M, Matsumoto I, Sumida T.
  • Journal Title: Mod Rheumatol. Volume: 25 Pages: 158-60
  • DOI: 10.3109/14397595.2014.884683
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The regulation of antigen-specific CD4+ T cells suppresses Sjogren's syndrome-like M3R induced autoimmune sialadenitis in vivo. (2015)
  • Author(s): Asashima H, Tsuboi H, Iizuka M, Hirota T, Kondo Y, Matsumoto I, Sumida T.
  • Journal Title: Arthritis Rheum. Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The role of M3 muscarinic acetylcholine receptor reactive T cells in Sjogren's syndrome: a critical review. (2014)
  • Author(s): Sumida T, Tsuboi H, Iizuka M, Hirota T, Asashima H, Matsumoto I.
  • Journal Title: J Autoimmun. Volume: 51 Pages: 44-50
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2013.12.012.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] The suppressive ability of altered peptide ligands to M3R reactive T cells in M3R induced autoimmune sialadenitis. (2014)
  • Author(s): Asashima H, Tsuboi H, Takahashi H, Hagiya C, Hirota T, Iizuka M, Kondo Y, Matsumoto I, Sumida T.
  • Organizer: 第43回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2014-12-10 – 2014-12-10
• [Presentation] Enforced RORγt expression in T cells induced spontaneous development. (2014)
  • Author(s): Iizuka M, Tsuboi H, Asashima H,Hirota T, Takahashi H, Kondo Y, Takahashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • Organizer: 第43回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2014-12-10 – 2014-12-10
• [Presentation] APL投与によるM3R誘導自己免疫性唾液腺炎の抗原特異的制御 (2014)
  • Author(s): 浅島弘充、坪井洋人、飯塚麻菜、高橋広行、萩谷千裕、近藤裕也、松本功、住田孝之
  • Organizer: 第23回日本シェーグレン症候群学会学術集会
  • Place of Presentation: 長崎
  • Year and Date: 2014-09-13 – 2014-09-13
• [Presentation] 唾液腺炎発症におけるTh17マスター転写因子RORγtの機能解析 (2014)
  • Author(s): 飯塚麻菜、坪井洋人、浅島弘充、廣田智哉、近藤裕也、高橋智、松本功、住田孝之
  • Organizer: 第23回日本シェーグレン症候群学会学術集会
  • Place of Presentation: 長崎
  • Year and Date: 2014-09-12 – 2014-09-12
• [Presentation] The suppressive ability of altered peptide ligands to M3R induced antoimmune sialoadenitis in vivo. (2014)
  • Author(s): Asashima H, Tsuboi H, Iizuka M, Hagiya C, Hirota T, Kondo Y, Matsumoto I, Sumida T.
  • Organizer: The EULAR Annual European Congress of Rheumatology
  • Place of Presentation: paris
  • Year and Date: 2014-06-12 – 2014-06-12
• [Presentation] RORgt inhibit the expression of Foxp3 in CD4+CD25+ T cells in spontaneous development Sjogren’s syndrome like sialadenitis (2014)
  • Author(s): Iizuka M, Tsuboi H, Asashima H, Hirota T, Kondo Y, Takahashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • Organizer: 第58回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-25 – 2014-04-25