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2013 Fiscal Year Research-status Report

サイトメガロウイルス感染症に対する新規抗ウイルス剤の分子基盤の解明

Research Project

Project/Area Number 24591492
Research InstitutionHokuriku University

Principal Investigator

村山 次哉  北陸大学, 薬学部, 教授 (60159184)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 定成 秀貴  北陸大学, 薬学部, 助教 (60121274)
Keywordsサイトメガロウイルス / トリシン / 抗ウイルス薬 / ケモカイン / siRNA
Research Abstract

研究計画:ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)感染細胞に対するトリシン(4', 5, 7-trihydroxy-3', 5' -dimethoxyflavone) の作用に関連するマイクロRNA(miRNA)を網羅的に解析して、その候補分子とトリシン作用との関連性を検証する。
H25年度の成果:1、H24年度に引き続き、HCMV感染及びトリシン処理により変動する宿主由来ケモカイン遺伝子の検証を行い、RT-PCR法により対象遺伝子発現の定量を行った。その結果、昨年度とは別の新たなケモカインを見出し、HCMVの感染価に依存した遺伝子発現の増強、HCMV感染により増強した遺伝子発現がトリシン処理により用量依存的に抑制される事を明らかにした。
2、この2つ目の新たなケモカインとHCMV増殖との関係を明らかにするために、siRNAにより遺伝子ノックダウンした宿主細胞を用いてHCMV増殖を検討した結果、その増殖がsiRNAの量に依存して抑制された。
3、この新たなケモカインsiRNAによるHCMV増殖の抑制は、リガンドを添加する事により回復した。
以上の事から、トリシンの抗HCMV作用機序の1つとして、この新たな2つ目のケモカインが関与している可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

HCMV感染およびトリシン処理により変動する宿主由来ケモカイン遺伝子の確認と検証、さらにこのケモカイン分子のsiRNAによる遺伝子ノックダウン細胞による新たなケモカインの検索と検討が比較的順調に進んだために、ある程度の成果をあげる事ができた。

Strategy for Future Research Activity

1、HCMV感染およびトリシン処理に対して応答し、トリシンの抗ウイルス作用機序の1つのターゲット分子としての可能性がある2つ目のケモカインを見出す事ができたので、このケモカインがHCMV感染・増殖にどのようにかかわっているのかを、更に明らかにして行く必要がある。そのため、当初のH26年度の研究実施計画を変更しなければならない可能性が出てきた。
2、今後の方向性としては、HCMV感染およびトリシン処理に対して応答するこれらのケモカイン分子の遺伝子応答を明らかにするために、細胞内シグナル伝達経路について解析して行く予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

今年度の計画として、当初国際学会での発表を予定してしていたが、スケジュールの調製がつかず参加・発表する事ができなかった。また、初年度とH25年度に渡り予定していたDNAチップを用いた、遺伝子の発現変動の網羅的な解析研究が、初年度に順調に進み当初の予定の研究成果を得る事ができた。以上のことから、次年度使用予定の予算額が生じた。
最終年度の研究遂行に必要な物品費(特に、細胞内シグナル伝達の解析研究のための試薬や抗体)および研究成果発表に伴う旅費や論文作成に伴う経費等に使用する。

  • Research Products

    (10 results)

All 2014 2013 2012 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (6 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Transgenic rice seed synthesizing diverse flavonoids at high levels: a new platform for flavonoid production with associated health benefits.2013

    • Author(s)
      Y. Ogo, K. Ozawa, T. Ishimaru, T. Murayama and F. Takaiwa
    • Journal Title

      Plant Biotechnol J

      Volume: 11 Pages: 734-746

    • DOI

      10.111/pbi.12064

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Inhibitory Effects of Statins on Expression of Immediate-early 1 Protein of Human Cytomegalovirus in Virus-infected Cells.2013

    • Author(s)
      H. Sadanari, T. Murayama, X. Zheng, R. Yamada, K. Matsubara, H. Yoshida, T. Takahashi
    • Journal Title

      J Exp Clin Med

      Volume: 5 Pages: 187-193

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Quantitative regulation of peripheral leukocyte by light exercise and tailored scale for assessment.2013

    • Author(s)
      N. Yamaguchi, R.Chen, K. Okamoto, T. Takei, M. Tsubokawa, D. Sakamoto, X.-F. Jia, W. Wu, T. Murayama
    • Journal Title

      Open Journal of Immunology

      Volume: 3 Pages: xxx

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Tricinと抗ヒトサイトメガロウイルス薬による併用効果2014

    • Author(s)
      山田理恵、定成秀貴、土田裕三、村山次哉
    • Organizer
      日本薬学会第134年会
    • Place of Presentation
      熊本大学
    • Year and Date
      20140327-20140330
  • [Presentation] Ganciclovirとtricin併用による抗ヒトサイトメガロウイルス作用機序の検討2013

    • Author(s)
      山田理恵、土田裕三、定成秀貴、村山次哉
    • Organizer
      第16回日本補完代替医療学会学術集会
    • Place of Presentation
      金沢勤労者プラザ
    • Year and Date
      20131130-20131201
  • [Presentation] クマザサ含有成分“Tricin”による抗ヒトサイトメガロウイルス作用機序の検討2013

    • Author(s)
      菊池万里絵、山田理恵、定成秀貴、松原恵子、土田裕三、村山次哉
    • Organizer
      第16回日本補完代替医療学会学術集会
    • Place of Presentation
      金沢勤労者プラザ
    • Year and Date
      20131130-20131201
  • [Presentation] ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)の初期―後期遺伝子と後期遺伝子のプロモーター活性を利用した抗HCMV剤検索検索システムの可能性2013

    • Author(s)
      定成秀貴、長尾嘉真、三谷逸人、安井真一、山田理恵、村山次哉
    • Organizer
      第61回日本ウイルス学会学術集会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場
    • Year and Date
      20131110-20131112
  • [Presentation] ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)の初期―後期遺伝子と後期遺伝子のプロモーター活性を利用した抗HCMV剤検索検索システムの構築2013

    • Author(s)
      定成秀貴、長尾嘉真、三谷逸人、安井真一、山田理恵、村山次哉
    • Organizer
      第23回日本抗ウイルス療法研究会総会
    • Place of Presentation
      リーガロイヤルホテル東京
    • Year and Date
      20130613-20130614
  • [Presentation] ヒトサイトメガロウイルスのUL100遺伝子の転写調節領域の解析

    • Author(s)
      松浦純児、定成秀貴、山田理恵、村山次哉
    • Organizer
      日本薬学会北陸支部第125回例会
    • Place of Presentation
      北陸大学薬学部
  • [Patent(Industrial Property Rights)] トリシンアミノ酸誘導体並びにそれを含む抗ウイルス剤及び抗癌剤2012

    • Inventor(s)
      村山次哉,土田裕三、二ノ宮真之、桜井大輔 他
    • Industrial Property Rights Holder
      村山次哉,土田裕三、二ノ宮真之、桜井大輔 他
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      5476321
    • Filing Date
      2012-05-31
    • Acquisition Date
      2014-02-14

URL: 

Published: 2015-05-28  

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