ＥＢＶ関連血球貪食性リンパ組織球症におけるＥＢＶ感染Ｔ細胞の解析と病態解明

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24591542
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 和田 泰三 金沢大学, 大学病院, 講師 (30313646)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: Epstein-Barrウイルス / 血球貪食性リンパ組織球症

Research Abstract

本年度は、Epstein-Barrウイルス（EBV）関連血球貪食性リンパ組織球症（EBV-HLH）のサイトカインプロファイルの特徴を明らかにした (Wada et al. Pediatr Blood Cancer, in press)。EBV-HLH患児11名と、コントロールとしてEBVによる伝染性単核症（IM）11名およびパーフォリン欠損による家族性血球貪食性リンパ組織球症（FHL2）4名から採取した急性期の血清もしくは血漿を用いて、炎症性ならびに抑制性サイトカイン計10種をELISAを用いて解析した。EBV-HLHではIMに比べ、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-18、ヘムオキシナーゼ-1が有意に高値を示した。しかし、これらはFHL2患児とほぼ同じプロファイルであった。したがって、EBV-HLHで認められたサイトカインプロファイルは、HLHという病態を反映しているものであり、CD8陽性T細胞に対するEBVの異所性感染に起因しているのではないことが示唆された。一方TNF-αは、EBV-HLH、IMともに上昇していた。またEBV感染細胞からviral IL-10が産生される可能性があるが、EBV-HLHにおけるIL-10高値については、FHL2と同程度であったことからviral IL-10の関与は高くないことが示唆された。これらサイトカインプロファイル解析と、フローサイトメトリーによる解析、すなわちCD8陽性T細胞におけるクローン性増殖とCD5発現低下の解析を組み合わせることは、EBV-HLHの診断、病態把握に非常に有用であることが示された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究は、EBV-HLHの臨床的検討、患児由来の細胞や血清を用いた細胞分子生物学的解析から、EBV-HLHの病態を解明し、臨床に役立てることを目的としている。これまでに細胞解析とサイトカイン解析の組み合わせが、EBV-HLH診療の極めて良い指標となることを明らかにしてきており、おおむね順調に進展していると考えている。

Strategy for Future Research Activity

今後もEBV-HLH症例の解析を続ける一方、多様なHLHを解析することによりEBV-HLHの病態を解明していく。特に、EBV感染CD8陽性T細胞におけるCD5発現低下の意義を解明したいと考えている。興味深いことに、パーフォリン欠損によるFHL2の5例全例で、EBV-HLHと異なりクローン性増殖は伴わないものの、急性期にCD5発現が低下した活性化CD8陽性T細胞が検出されている（論文準備中）。このことは、CD8陽性T細胞においてHLHに共通した、CD5低下をはじめとした異常免疫応答が存在する可能性を示している。またEBV-HLHに特有の細胞マーカーや血清マーカーを見出すべく、実際の臨床の材料を用いて検討中である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

フローサイトメトリーによる細胞の表面抗原解析に必要な単クローン抗体、細胞分離や細胞培養に必要な試薬、サイトカイン測定に必要なELISAキットなど、消耗品の購入にもっとも研究費を使用する予定である。また、成果を社会に還元するため、国内外での学会発表や国際誌への論文執筆は必須と考えており、これらに対する経費も必要である。なお、平成24年度に若干の未使用額（\6,561）が生じているが、効率的な予算執行により端数が生じたためである。

Research Products

• [Journal Article] Aberrant glycosylation of IgA in Wiskott-Aldrich syndrome and X-linked thrombocytopenia (2013)
  • Author(s): Shimizu M, Kanegane H, Wada T, Motoyoshi Y, Morio T, Candotti F, Yachie A.
  • Journal Title: J Allergy Clin Immunol Volume: 131 Pages: 587-590
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2012.08.040
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Successful bone marrow transplantation with reduced intensity conditioning in a patient with delayed-onset adenosine deaminase deficiency (2013)
  • Author(s): Kanegane H, Taneichi H, Nomura K, Wada T, Yachie A, Imai K, Ariga T, Santisteban I, Hershfield MS, Miyawaki T.
  • Journal Title: Pediatr Transplant Volume: 17 Pages: E29-32
  • DOI: 10.1111/j.1399-3046.2012.01762.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical and immunophenotypic features of atypical complete DiGeorge syndrome (2013)
  • Author(s): Vu QV, Wada T, Toma T, Tajima H, Maeda M, Tanaka R, Oh-Ishi T, Yachie A.
  • Journal Title: Pediatr Int Volume: 55 Pages: 2-6
  • DOI: 10.1111/j.1442-200X.2012.03722.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Agranulocytosis after infectious mononucleosis (2013)
  • Author(s): Yokoyama T, Tokuhisa Y, Toga A, Fujiki T, Sakakibara Y, Mase S, Araki R, Nishimura R, Wada T, Fuseda T, Kato E, Yachie A.
  • Journal Title: J Clin Virol Volume: 56 Pages: 271-273
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2012.11.016
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Rapid detection of intracellular p47phox and p67phox by flow cytometry; Useful screening tests for chronic granulomatous disease (2013)
  • Author(s): Wada T, Muraoka M, Toma T, Imai T, Shigemura T, Agematsu K, Haraguchi K, Moriuchi H, Oh-Ishi T, Kitoh T, Ohara O, Morio T, Yachie A.
  • Journal Title: J Clin Immunol Volume: in press Pages: in press
  • DOI: 10.1007/s10875-012-9859-9
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cytokine profiles in children with primary Epstein-Barr virus infection (2013)
  • Author(s): Wada T, Muraoka M, Yokoyama T, Toma T, Kanegane H, Yachie A.
  • Journal Title: Pediatr Blood Cancer Volume: in press Pages: in press
  • DOI: 10.1002/pbc.24480
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Expansion of a liver-infiltrating cytotoxic T-lymphocyte clone in concert with the development of hepatitis-associated aplastic anaemia (2013)
  • Author(s): Ikawa Y, Nishimura R, Kuroda R, Mase S, Araki R, Maeba H, Wada T, Toma T, Koizumi S, Yachie A.
  • Journal Title: Br J Haematol Volume: in press Pages: in press
  • DOI: 10.1111/bjh.12259
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Delayed onset adenosine deaminase deficiency associated with acute disseminated encephalomyelitis (2012)
  • Author(s): Nakaoka H, Kanegane H, Taneichi H, Miya K, Yang X, Nomura K, Takezaki S, Yamada M, Ohara O, Kamae C, Imai K, Nonoyama S, Wada T, Yachie A, Hershfield MS, Ariga T, Miyawaki T.
  • Journal Title: Int J Hematol Volume: 95 Pages: 692-696
  • DOI: 10.1007/s12185-012-1055-4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Multiple reversions of an IL2RG mutation restore T cell function in an X-linked severe combined immunodeficiency patient (2012)
  • Author(s): Kawai T, Saito M, Nishikomori R, Yasumi T, Izawa K, Murakami T, Okamoto S, Mori Y, Nakagawa N, Imai K, Nonoyama S, Wada T, Yachie A, Ohmori K, Nakahata T, Heike T.
  • Journal Title: J Clin Immunol Volume: 32 Pages: 690-697
  • DOI: 10.1007/s10875-012-9684-1
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clonal expansion of Epstein-Barr virus (EBV)-infected γδ T cells in patients with chronic active EBV disease and hydroa vacciniforme-like eruptions (2012)
  • Author(s): Wada T, Toga A, Sakakibara Y, Toma T, Hasegawa M, Takehara K, Shigemura T, Agematsu K, Yachie A.
  • Journal Title: Int J Hematol Volume: 96 Pages: 443-449
  • DOI: 10.1007/s12185-012-1156-0
  • Peer Reviewed
• [Presentation] EBV-HLHの免疫病態 (2012)
  • Author(s): 和田泰三
  • Organizer: 日本小児感染症学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 西日本総合展示場（福岡県）
  • Year and Date: 20121124-20121125
• [Presentation] γδT細胞感染型の慢性活動性EBV感染症3例におけるγδT細胞の解析 (2012)
  • Author(s): 和田泰三、榊原康久、栂暁子、東馬智子、長谷川稔、田中理砂、大石勉、重村倫成、上松一永、谷内江昭宏
  • Organizer: 日本小児科学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場（福岡県）
  • Year and Date: 20120421-20120422