2014 Fiscal Year Annual Research Report
川崎病冠動脈病変の機序と治療法の開発：単離血球によるＭＭＰとＴＩＭＰの動態の解明
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24591555
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| Research Institution | Oita University |
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Principal Investigator |
是松 聖悟 大分大学, 医学部, 教授 (60264347)
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2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 川崎病 / MMP9 / 顆粒球 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【目的】川崎病における冠動脈瘤形成への関与が示唆されているMatrix metalloproteinase（MMP）9とTissue inhibitor of matrix metalloproteinase （TIMP）1について、我々は、前者が顆粒球に、後者が血小板に高濃度に含有されていることが見出した。今回は、健常者の顆粒球、血小板のそれぞれを各種薬剤と共培養し、それぞれに対する顆粒球MMP9と血小板TIMP1の反応性について検討した。
【方法】川崎病患児と、健常成人8名の末梢血を採取し、Ficoll遠心密度勾配法、10%アルブミン、6%デキストラン処理にて、顆粒球、血小板を単離精製後、それぞれ10%FCS添加RPMI、5%アルブミン添加Tyrode-HEPESに懸濁し、ガンマグロブリン（50mg／ml）、メチルプレドニゾロン（80μg／ml）、ウリナスタチン（100U／ml）と共培養した。Dual Fluoresence Cell Counter（Logos System）を用いて各血球の培養中の生存能を、また、ELISA法（第一ファインケミカル）を用いて培養上清中のMMP9、TIMP1蛋白量を検討した。
【結果】顆粒球は3時間後まで、血小板は6時間後まで生細胞がみられた。培養3時間後の顆粒球MMP9（ng／ml）は、無刺激時に比し、ガンマグロブリン共培養下で低下（131.7±60.2→87.8±38.7、p=0.117）したが、メチルプレドニゾロン、ウリナスタチンに差はみられなかった。血小板TIMPはこの3薬剤による影響を受けなかった。
【結論】顆粒球MMP9の抑制にはガンマグロブリンが有効である可能性を示唆した。
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