2012 Fiscal Year Research-status Report
メラノーマにおける熱ショック転写因子の抗腫瘍効果解析と治療的応用の検討
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24591627
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
中村 好貴 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (00448292)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武藤 正彦 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40175625)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | malignant melanoma / heat shock factor 1 |
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| Research Abstract |
メラノーマ細胞株であるMeWoにアデノウイルスを感染させHSF1をノックダウンした後に、細胞を6cm dishに播種し、人工的な創を作成しWound healing assayを行った。コントロールを感染させた細胞と比べ、HSF1をノックダウンしたMeWoでは創が閉じるスピードが低下することを確認した。他のメラノーマ細胞株であるHMV-I、HMV-IIでも同様の結果を確認している。
また、遊走能、浸潤能を検討するために、BD BioCoatを用いて、Migration assay, Invasion assayを行った。コントロールを感染させた細胞と比べ、HSF1をノックダウンしたMeWoでは遊走能、浸潤能ともに低下することを確認した。他のメラノーマ細胞株であるHMV-I、HMV-IIでも同様の結果を確認している。
また、メラノーマ細胞株であるHMV-Iにおいて、HSF1をノックダウンした後にHSF1を再び発現させWound healing assay、Migration assay、Invasion assayを行った。HSF1を再び発現させたHMV-Iでは、HSF1をノックダウンしたものと比べ、遊走能、浸潤能ともに回復することを確認した。
以上の結果より、HSF1がメラノーマの遊走能、浸潤能に非常に重要であることを確認した。HSF1のターゲット遺伝子の同定、メラノーマ組織におけるHSF1の発現量についての検討は同時に進行し、解析を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在までに、HSF1がメラノーマの遊走能、浸潤能に非常に重要であることをin vitroの実験で確認することができた。HSF1のターゲット遺伝子の同定、メラノーマ組織におけるHSF1の発現量についての検討は同時に進行し、解析を行っており、順調に結果を出すことができている。実験の進行は研究計画に沿って、おおむね順調に進展していると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
in vitroの実験においてHSF1がメラノーマの遊走能、浸潤能に非常に重要であることを確認した。今後はこの結果をnude mouseを用いたin vivoの実験で確認する予定である。nude mouseにHSF1をノックダウンしたメラノーマ細胞株を皮下に移植し、コントロールと比較し、増殖能が低下するかどうかを腫瘍径を測定し確認する。移植後１ヶ月後にmouseを安楽死させ、肺、肝臓を取り出し、転移したメラノーマを病理組織学的に検討する。in vitoroの結果からHSF1をノックダウンしたメラノーマ細胞を移植したmouseでは転移能が低下していると考えられる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
該当なし
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Research Products
(6 results)
