2014 Fiscal Year Annual Research Report
ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ経路を標的とする放射線増感剤の開発－胃癌細胞での検討－
| Project/Area Number |
24591850
|
|---|
| Research Institution | Keio University |
|---|
Principal Investigator |
茂松 直之 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (30178868)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
深田 淳一 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (50338159)
西村 修一 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (40571138)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
|
| Keywords | 放射線治療 / 放射線生物学 / 放射線増感剤 / 胃癌 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までの研究結果を踏まえて、放射線増感効果の高いPI3K/Akt/mTOR経路阻害剤を探索した。胃癌細胞セルラインとして前年度同様MKN45, MKN74を使用し、阻害剤としてPI3/Aktの機能阻害剤である低分子化合物LY294002、mTOR阻害剤であるRAD001（エベロリムス）、PIK/mTOR複合阻害剤であるNVP-BEZ235を選択した。いずれの薬剤も単独投与による殺細胞効果をMTTアッセイ法で確認し、投与濃度を決定した。
コロニー法にて照射単独、薬剤投与単独、照射と薬剤の併用（同時投与、薬剤を除いた後に投与）の4通りについてコロニー形成を観察した。いずれの薬剤も照射との併用で生存率の低下を認めたが、特に同時併用で低下が認められた。
これに続いて、上記と同様の4通りについて細胞周期をフローサイトメトリー（FACS）を用いて測定した。細胞の回収30分後、24時間後、48時間後に細胞周期を測定し、G2/G1比の変化を比較検討した。その結果、48時間後に照射と薬剤（NVP-BEZ235）同時投与を行った細胞ではMKN45（0.06→0.78、コントロール→同時投与）、MKN74（0.17→1.42）とG2/G1比の著明な上昇が観察された。このような変化は他の薬剤との併用や照射単独、薬剤単独、異時投与では認められなかった。
まとめとして、検討したいずれのPI3K/Akt/mTOR経路阻害剤においても放射線照射との併用効果が認められた。とりわけPIK/mTOR複合阻害剤であるNVP-BEZ235はG2/G1比の著明な上昇が観察され、照射の増感効果が期待される薬剤と考えられた。
|
