2013 Fiscal Year Research-status Report
重粒子線におけるmiRNAの発現より新たな中皮腫治療法の可能性
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24591859
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Research Institution | National Institute of Radiological Sciences |
Principal Investigator |
劉 翠華 独立行政法人放射線医学総合研究所, 重粒子医科学センター, 主任研究員 (00512427)
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Keywords | 悪性中皮腫 / 炭素線 / 高LET / miRNA / miRNAプロファィリング |
Research Abstract |
悪性中皮腫は難治性腫瘍であることが良く知られている。放射線医学総合研究所にある重粒子照射装置の炭素線は様々なガン治療に対して優れた成績が上がっている。去年、一種類の悪性中皮腫細胞をX線や炭素線照射後、綱羅的MiRNAプロファイリング解析を行った結果、重粒子線照射された中皮腫細胞についてmiRNAの発現はX線と異なることが示唆された。今年度、また新たなヒト由来である二種類の中皮腫細胞をX線と高LET炭素線照射し、同じく綱羅的MiRNAプロファイリング解析を行った。高LET細胞致死メカニズムをmiRNA発現レベルで試みた。 二種類の悪性中皮腫細胞を2Gy X線や高LET炭素線で照射し、照射後細胞をサブカルチャーして24時間後に細胞を収集し、miRNAを含むトータルRNAを抽出した。抽出したRNAはnanodropで吸光度を測定し、RNA分解度、品質チェックなどについてAgilent 2100 Bioanalyzerを用いて検定し、miCURY LNATM microRNA Array kit を用い、一色法でmicroRNA Arrayの解析を行った。二種類の悪性中皮腫細胞の中にあるH2052細胞のmiRNA アレーのfold changeについてX線と比較し、up regulation のmiRNAは25個、 down regulationのmiRNAは8個あった。一方もう一種類の中皮腫細胞H2452についてup regulation のmiRNAは14個、down regulationのmiRNAは22個であった。二種類の悪性中皮腫細胞ともに変動したmiRNAは16個あることが分かった。しかしup regulation とdown regulationのRNAは2種類の細胞の中で真反対であった。この結果により、同じ中皮腫細胞でも炭素線照射後異なる反応が示唆された。今現在変動あるmiRNA機能についてmiRNA mimicとmiRNA inhibitorを使って遺伝子機能解析を行っている。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
重粒子線は放射線医学総合研究所の重粒子線がん治療装置(HIMAC)を使用でき、重粒子線の対照実験は同研究所のX線照射装置を利用する事が出来る。HIMAC利用に関しては、既にHIMAC共同研究課題が採択されており、マシンタイム配分を受ける事が出来たが、 去年細胞培養に使った血清について問題があることが分かり、急遽に血清を変えないといけないので、研究はやや遅れている。
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Strategy for Future Research Activity |
二年間得られたmiRNA プロファィリングの結果を基にして、集中して実験を行う。具体的にmiRNAの機能を解析するのに、miRNA mimic,miRNA inhibitorを細胞に導入し、細胞増殖、致死、およびウェスタンでタンパク質発現などを行う。
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Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
前年度使用した血清に問題あることが分かった。一時的に実験を中断した、そのため一部の実験ができなかった。 残した科研費は去年できなかった実験を使う予定である。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Effects of shielding on the induction of 53BP1 foci and micronuclei after Fe ion exposures2014
Author(s)
Wentao Hu , Hailong Pei , He Li , Nan Ding , Jufang Wang , Jinpeng He , Yoshiya Furusawa , Ryoichi Hirayama , Yoshitaka Matsumoto , Cuihua Liu , Yinghui Li , Tetsuya Kawata , Guangming Zhou
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Journal Title
Journal of radiation research
Volume: 55
Pages: 10-16
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Comparison of the repair of potentially lethal damage after low- and high-LET radiation exposure, assessed from the kinetics and fidelity of chromosome rejoining in normal human fibroblasts2013
Author(s)
Cuihua Liu , Guangming Zhou , Tetsuya Kawata , Yoshiya Furusawa , Ryuichi Kota , Atsuhiro Kumabe , Shinya Sutani , Junichi Fukada , Masayo Mishima , Naoyuki Shigematsu , Kerry George , Francis Cucinotta
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Journal Title
Journal of Radiation Research
Volume: 54
Pages: 989-997
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Simulated studies on the biological effects of space radiationSimulated studies on the biological effects of space on quiescent human fibroblasts2013
Author(s)
Nan Ding , Hailong Pei , Jinpeng He , Yoshiya Furusawa , Ryoichi Hirayama , Cuihua Liu , Yoshitaka Matsumoto , He Li , Wentao Hu , Yinghui Li , Jufang Wang
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Journal Title
Advances in Space Research
Volume: 52
Pages: 1314-1319
DOI
Peer Reviewed
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