膵臓癌におけるＢｃｌ－ｘＬとＭｃｌ－１の機能解明とｓｉＲＮＡを用いた臨床応用

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24592036
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 高橋 広城 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30381792)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐藤 幹則 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20305551) ; 松尾 洋一 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40381800)
• Keywords: 膵臓癌 / アポトーシス / Bcl-2ファミリー蛋白 / RNA干渉

Research Abstract

RNA干渉によるBcl-2ファミリー蛋白の抑制が膵臓癌に及ぼす影響についてBcl-2, Bcl-xL, Mcl-1およびこれらのコンビネーション（Bcl-2+Bcl-xL, Bcl-2+Mcl-1, Bcl-xL+Mcl-1）をRNA 干渉により抑制し、アポトーシスへの影響を検討した。その結果、Bcl-xLとMcl-1をknock downした際に非常に強いアポトーシス誘導効果が認められることが判明した。
・またこの効果はチトクロームCの細胞質への流出、Bax活性化、カスパーゼカスケードによって仲介されていることが判明した。
・ヌードマウス膵癌皮下移植モデルを作成し、Bcl-xL/Mcl-1 siRNAとアテロコラーゲンcomplexを腫瘍内に1回/ 週の間隔で局所注入し、その抗腫瘍効果を検討した。その結果大きな副作用は認めず、両群間に生育の差は認めなかった。適宜腫瘍のサイズを計測し、6週間後に腫瘍を摘出し腫瘍の重量を計測した結果、Bcl-xL/Mcl-1 siRNA群で優位に腫瘍の増殖抑制効果が認められた。
・今後このin vivoの結果が得られた理由を分子生物学的に検討する予定である。またヌードマウスを用いた膵癌同所移植モデルを作成し、Bcl-xL/Mcl-1 siRNAの効果を検討する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

RNA干渉によるBcl-2ファミリー蛋白の抑制が膵臓癌に及ぼす影響について、膵癌細胞株を用いて分子生物学的に詳細を証明することができた。さらに効果をヌードマウスを用いたin vivoの実験系で証明することができた。これまでに同様の報告をin vivoで証明した報告はなく重要な結果と考えている。

Strategy for Future Research Activity

ヌードマウス膵癌皮下移植モデルにおいて、Bcl-xL/Mcl-1 siRNA投与が腫瘍縮小効果に及ぼした影響を分子生物学的に検討する。
またヌードマウスを用いて膵癌同所移植モデルを作成し、Bcl-xL/Mcl-1 siRNAを静脈内投与し、皮下腫瘍モデルと同様の検討を行う。

Research Products

• [Journal Article] Zerumbone inhibits tumor angiogenesis via NF-κB in gastric cancer. (2014)
  • Author(s): Tsuboi K, Matsuo Y, Shamoto T, Shibata T, Koide S, Morimoto M, Guha S, Sung B, Aggarwal BB, Takahashi H, Takeyama H.
  • Journal Title: Oncol Rep Volume: 31 Pages: 51-64
  • DOI: 10.3892/or.2013.2842
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Girdin, a regulator of cell motility, is a potential prognostic marker for esophageal squamous cell carcinoma. (2013)
  • Author(s): Shibata T, Matsuo Y, Shamoto T, Hirokawa T, Tsuboi K, Takahashi H, Ishiguro H, Kimura M, Takeyama H, Inagaki H.
  • Journal Title: Oncol Rep Volume: 29 Pages: 2127-32
  • DOI: 10.3892/or.2013.2406
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Simultaneous knock-down of Bcl-xL and Mcl-1 induces apoptosis through Bax activation in pancreatic cancer cells. (2013)
  • Author(s): Takahashi H, Chen MC, Pham H, Matsuo Y, Ishiguro H, Reber HA, Takeyama H, Hines OJ, Eibl G.
  • Journal Title: Biochim Biophys Acta Volume: 1833 Pages: 2980-7
  • DOI: 10.1016/j.bbamcr.2013.08.006
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Simultaneous knock-down of Bcl-xl and Mcl-1 induced pancreatic cancer apoptosis in vitro and in vivo. (2013)
  • Author(s): Takahashi H, Matsuo Y, Takeyama H, Eibl G
  • Organizer: IAP&KPBA 2013
  • Place of Presentation: Sheraton Grande Walkerhill Hotel(Seoul, Korea)
  • Year and Date: 20130904-20130907
• [Presentation] 消化器癌血管新生におけるcytokine networkの役割とHGFの関与 (2013)
  • Author(s): 松尾洋一、柴田孝弥、坪井 謙、社本智也、長﨑高也、高橋広城、舟橋 整、佐藤幹則、岡田祐二、竹山廣光
  • Organizer: 第68回日本消化器外科学会総会
  • Place of Presentation: シーガイアコンベンションセンター(宮崎県)
  • Year and Date: 20130717-20130719
• [Presentation] 膵癌血管新生シグナルにおけるPTENの役割 (2013)
  • Author(s): 松尾洋一、柴田孝弥、坪井 謙、社本智也、長﨑高也、高橋広城、舟橋 整、佐藤幹則、岡田祐二、竹山廣光
  • Organizer: 第22回日本がん転移学会学術集会･総会
  • Place of Presentation: ホテルブエナビスタ松本(長野県)
  • Year and Date: 20130711-20130712
• [Presentation] Simultaneous knockdown of BclxL and Mcl1 induces pancreatic cancer apoptosis in vitro and in vivo. (2013)
  • Author(s): 高橋広城、坪井 謙、松尾洋一、岡田祐二、竹山廣光
  • Organizer: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場(福岡県)
  • Year and Date: 20130411-20130413