胆道癌幹細胞を標的とした癌ペプチドワクチン療法の開発

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592041
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 有賀 淳 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (40221056)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 癌ワクチン / 胆道癌 / 癌幹細胞 / 癌抗原 / ペプチドワクチン / 免疫療法

Outline of Annual Research Achievements

胆道癌は有効な治療法に乏しく極めて予後不良な疾患であり、新治療法の開発が必須とされている。癌ワクチンもその一つであるが、近年発見された癌幹細胞を標的とした治療の重要性が認識されており、今回胆道癌幹細胞特異抗原を標的とした癌ワクチンの開発を目指して本研究を実施した。ヒト癌幹細胞特異的表面分子であるCD13, CD24, CD44, CD90, CD133, CD166, CD326の発現をヒト胆道癌培養細胞(IsCC)を用いて解析した結果、特にCD44, CD90, CD326陽性細胞分画の存在が確認されたため、マイクロビーズ結合抗体を用いて各陽性分画と陰性分画を分離採取してtotal RNAを抽出し作成したcDNAを用いて、胆道癌特異抗原のmRNA発現をrealtime PCRにて解析した。IsCC中のCD90陽性細胞分画ではWDR16, LY6K, WT1, GPC3の遺伝子発現が増強しており、CD44陽性分画ではLY6KとGPC3が、CD326陽性分画ではWDR16, CDH3, MUC1, GPC3遺伝子発現の増強が著明であった。これより、胆道癌特異抗原の中で癌幹細胞分画で特に発現が増強する抗原が確認され、癌幹細胞標的分子候補が選択可能と考えられた。細胞にストレスが加わると発現が増強する分子が存在するが、IsCCにheat shockを加えた時の癌抗原の発現を検討したところ、加温直後でWDR16が、1日後にHJURP, DEPDC1, KIF20A, CDH3の遺伝子発現の増強が確認された。さらに、IsCCに iPS細胞誘導遺伝子を導入した時には、LY6K, GPC3, WT1が著明に増強する一方でWDR16、IGF2BP3、CDH3の遺伝子発現の減弱が認められた。今回の研究結果を基に胆道癌幹細胞特異抗原標的癌ワクチンの開発が期待される。