新規血小板活性化受容体ＣＬＥＣ－２の悪性グリオーマの増殖能及び浸潤能への関与

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592156
• Research Institution: University of Yamanashi
• Principal Investigator: 佐藤 浩企 山梨大学, 総合研究部, 助教 (50596997)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 川瀧 智之 山梨大学, 総合研究部, 講師 (20303406) ; 尾崎 由基男 山梨大学, 総合研究部, 教授 (30134539) ; 井上 修 山梨大学, 総合研究部, 准教授 (00432154)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: CLEC-2 / ポドプラニン / グリオーマ

Outline of Annual Research Achievements

前年度のin vitroの実験の続きとして、ヒトグリオーマ細胞株を用いたCLEC-2の実験系を構築するため、ポドプラニン発現グリオーマ細胞株に対してsiRNAを用いたポドプラニンのノックダウンを行い、同じヒトグリオーマ細胞株でポドプラニン発現陽性と陰性の細胞系を作成した。それらの細胞株を用いて、CLEC-2との反応による遊走能の違いを検討する実験を行った。ボイデンチャンバーを用いたcell migration assay法にて実験を行ったが、細胞遊走能の結果には実験ごとのばらつきも生じ、結果的にポドプラニンの有無による明らかな有意差は証明できなかった。
また、in vivoでの実験として、ヌードマウスに抗CLEC-2抗体を投与し、CLEC-2ノックダウンのヌードマウスを作成した。ポドプラニン発現陽性のヒトグリオーマ細胞株を、コントロールのヌードマウスとCLEC-2ノックダウンヌードマウスの皮下にそれぞれ移植し、移植後の腫瘍体積およびマウスの体重の変化を比較した。移植後26日目までの観察を行い、マウスの体重変化において、CLEC-2ノックダウン群がコントロール群より有意に増加したものの、移植した腫瘍体積変化においては、コントロール群とCLEC-2ノックダウン群に有意差は認められなかった。
以上より、結論として、今回の実験からヒト神経膠芽腫の遊走能および増殖能において、ポドプラニンとCLEC-2の関与は明らかではなかった。