新規マウス軟部肉腫高肺転移株の樹立と肺転移再現動物モデルの開発

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592233
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 中 紀文 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90601964)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 秀樹 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60191558)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 骨軟部腫瘍 / 肉腫細胞株 / 動物実験モデル / 転移能 / plexin / semaphorin

Outline of Annual Research Achievements

マウス良性神経系軟部腫瘍TR6BC1から尾静注→肺転移形成→in vitro細胞培養→再度尾静注の操作（Fidler法）を繰り返し，マウス軟部肉腫で初めて自然肺転移を生じる高肺転移株TR6BC1-LMを樹立することに成功した．本細胞株はマウス尾静注のみならず背部皮下への移植によってほぼ100%の確率で肺転移巣を形成することが確認された．TR6BC1-LMは2次元の増殖能は親株と同程度であったが，3次元の増殖能やマウスでの腫瘤形成能は親株に比べ有意に増大しており，運動能，浸潤能も有意に亢進していた．両細胞株の発現解析を行い生物学的機能の差を生じる機能分子の候補を複数確認した．
最終年度に複数の候補機能分子の中から，神経系細胞で軸索伸展や遊走能に関与する Semaphorin4D/PlexinB1シグナル伝達路に焦点を絞り，発現および機能解析実験を行った．高肺転移株TR6BC1-LM においてSemaphorin4Dの受容体であるPlexinB1はRNAレベル，タンパクレベルでともに発現が増強していた，RNA干渉による機能抑制実験において運動能，浸潤能が著しい減弱を示すことが観察され，Semaphorin4D/PlexinB1シグナルが肺転移能を賦与する機能分子群の一つである可能性が示唆された．
上記の知見を臨床応用するために，今後，Semaphorin4D/PlexinB1シグナル伝達路を特異的に抑制する候補化合物を入手し，in vitro, in vivo の実験系で運動能，浸潤能およびマウスでの腫瘤形成能，肺転移能に対する抑制効果を検討していく予定である．

Research Products

• [Journal Article] Tailored Therapeutic Strategies for Synovial Sarcoma: Receptor Tyrosine Kinase Pathway Analyses Predict Sensitivity to the mTOR Inhibitor RAD001. (2014)
  • Author(s): Yasui H, Naka N, Imura Y, Outani H, Kaneko K, Hamada KI, Sasagawa S, Araki N, Ueda T, Itoh K, Myoui A, Yoshikawa H.
  • Journal Title: Cancer Lett. Volume: 347 Pages: 114-122
  • DOI: 10.101610.1016/j.canlet.2014.01.027.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Expression of noggin, an antagonist of bone morphogenetic protein, in schwannoma: A possible mechanism. (2014)
  • Author(s): Kaneko K, Higuchi C, Naka N, Yoshikawa H.
  • Journal Title: Oncol Lett Volume: 8 Pages: 111-116
  • DOI: 10.3892/ol.2014.2138.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Deflection of VEGF action by SS18-SSX and composite VEGF- and CXCR4-targeted therapy in synovial sarcoma. (2014)
  • Author(s): Wakamatsu T, Naka N, Sasagawa S, Tanaka T, Takenaka S, Araki N, Ueda T, Nishizawa Y, Yoshikawa H, Itoh K.
  • Journal Title: Cancer Sci. Volume: 105 Pages: 1124-1134
  • DOI: 10.1111/cas.12469.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Establishment of a novel clear cell sarcoma cell line (Hewga-CCS), and investigation of the antitumor effects of pazopanib on Hewga-CCS. (2014)
  • Author(s): Outani H, Tanaka T, Wakamatsu T, Imura Y, Hamada K, Araki N, Itoh K, Yoshikawa H, Naka N.
  • Journal Title: BMC Cancer Volume: 14 Pages: 455
  • DOI: 10.1186/1471-2407-14-455.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Combined targeting of mTOR and c-MET signaling pathways for effective management of epithelioid sarcoma. (2014)
  • Author(s): Imura Y, Yasui H, Outani H, Wakamatsu T, Hamada K, Nakai T, Yamada S, Myoui A, Araki N, Ueda T, Itoh K, Yoshikawa H, Naka N.
  • Journal Title: Mol Cancer Volume: 13 Pages: 185
  • DOI: 10.1186/1476-4598-13-185.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 類上皮肉腫に対するmTORとc-METを標的とした抗腫瘍効果 (2014)
  • Author(s): 伊村慶紀，王谷英達，濱田健一郎，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
  • Invited
• [Presentation] 肉腫と幹細胞 (2014)
  • Author(s): 中 紀文
  • Organizer: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-18
  • Invited
• [Presentation] 類上皮肉腫に対するmTOR阻害剤(RAD001)とMET阻害剤(INC280)の併用による抗腫瘍効果 (2014)
  • Author(s): 伊村慶紀，安井広彦，王谷英達，濱田健一郎，竹中 聡，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • Organizer: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-18
• [Presentation] 滑膜肉腫へのmTOR阻害剤の効果を予測するバイオマーカーの提案 (2014)
  • Author(s): 安井広彦，伊村慶紀，王谷英達，濱田健一郎，竹中 聡，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • Organizer: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-18
• [Presentation] Combined targeting of mTOR and c-MET significantly inhibits epithelioid sarcoma cell growth. (2014)
  • Author(s): Yoshinori Imura, Norifumi Naka, Hirohiko Yasui, Hidetatsu Otani, Keiko Kaneko, Satoshi Takenaka, Kenichiro Hamada, Satoru Sasagawa, Akira Myoui, Nobuhito Araki, Takafumi Ueda, Kazuyuki Itoh, Hideki Yoshikawa
  • Organizer: Metastasis research society 15th International Biennial Congress
  • Place of Presentation: Heidelberg, Germany
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-07-01
• [Presentation] Dynamic analysis of lung metastasis by mouse osteosarcoma. (2014)
  • Author(s): Takaaki Tanaka, Yoshihiro Yui, Norifumi Naka, Toru Wakamatsu, Kazuyuki Itoh, Hideki Yoshikawa
  • Organizer: Metastasis research society 15th International Biennial Congress
  • Place of Presentation: Heidelberg, Germany
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-07-01